實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
特別提示：本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
豬霍亂病毒即PCR熒光定量檢測試劑盒 | Hog Cholera Virus(CSFV)RTPCR | 多種規(guī)格 | BJ-P6857 |
特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據鮑皰疹樣病毒保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
儲存條件：-20℃以下，有效期12個月。
二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 １．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。 ２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。 ３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。 ４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 ５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。 ６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。 ７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
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操作流程
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
2 ug pBAsi-mU6 pBAsi-mU6 低溫運輸，-20℃保存BL瓊脂培養(yǎng)基進口、國產BL medium用于雙歧桿菌分離培養(yǎng)(GB標準)250
2 ug pGL4.17[luc2/Neo] pGL4.17[luc2/Neo] 低溫運輸，-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人乳腺珠蛋白(Mammaglobin-A) ELISA試劑盒
凍干兔血漿 Freeze dried rabbit plasma 0.5ml*10BDS培養(yǎng)基進口、國產BDS Medium用于培養(yǎng)擬桿菌250
100µL 小鼠抗VSV-G標簽單抗 Anti VSV-G-Tag Mouse MAb -20℃保存 0.156-10 ng/mL 人S100鈣結合蛋白A11(S100A11)ELISA試劑盒
單增李斯特氏菌成套生化鑒定管 9種*2套/盒*5盒沙氏腦心浸液瓊脂進口、國產Sabouraud BHI Agar250克真菌檢測
10g 硫酸葡聚糖 Dextran Sulfate 室溫保存特級胎牛血清進口、國產Fetal bovine serum(Defined FBS) 100毫升BR
乳酸桿菌糖發(fā)酵培養(yǎng)基 Lactobacillus Carbohydrate Fermentation Medium 250g 0.625-40 ng/mL 人小眼相關轉錄因子(MITF)ELISA試劑盒
20次 Southern專用DNA Marker() 15.6-1000 pg/mL 人白介素33(IL-33)ELISA試劑盒
1瓶 MEL株 MEL 低溫運輸和保存
腦心浸出液肉湯（BHI）GB標準 Brain Heart Influsion Broth 250g 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Angiotensinogen
1g B12 Vitamin B12 4℃避光保存血清消化粉進口、國產Serum powder250克BR
豬霍亂病毒即PCR熒光定量檢測試劑盒Mallory PTAH染色液(自然氧化法) 100ml
Mallory磷鎢酸(PTAH自然氧化法) 3×100ml
Mallory PTAH染色液(化學氧化法) 100ml
Mallory磷鎢酸(PTAH化學氧化法) 3×100ml
Thomas磷鉬酸 2×100ml
Gomori銀氨溶液 100ml
網狀纖維染色液(改良Gomori銀氨法) 5×50ml
Gordon-Sweets銀氨溶液 100ml
網狀纖維染色液(改良Gordon-Sweets法) 6×50ml
麗春紅酸性品紅染色液 100ml
Masson三色染色液 7×50ml|7×100ml
