操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
Temsirolimus | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|100mg | FS-X10550 |
產(chǎn)品介紹:
Temsirolimus是一種mTOR抑制劑,IC50值為1.76μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):162635-04-3 別名:Torisel;CCI-779 純度:98.88% 分子量:1030.29 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
安絡(luò)小皮傘*B淋巴前體蛋白1抗體Anti-MCC Antibody熱休克蛋白β8(HSPβ8)
大腸埃希菌血管內(nèi)皮粘附分子抗體Anti-MCL1 Antibody(PB0152)熱休克蛋白β6(HSPβ6)
假單胞菌屬血管非炎性蛋白2抗體Anti-MCM2 Antibody熱休克蛋白β2(HSPβ2)
少根根霉腦視網(wǎng)膜血管瘤G7蛋白抗體(逢希伯-林道氏?。〢nti-MCM4 Antibody熱休克蛋白90(HSP90)
大腸埃希氏桿菌腦特異性鈉依賴(lài)無(wú)機(jī)磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體Anti-MCM2 Antibody熱休克蛋白47(HSP47)
枯草芽孢桿菌腦單類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體Anti-MCM2 Antibody熱休克蛋白40(HSP40)
*灰葡萄孢腦視網(wǎng)膜血管瘤G7蛋白抗體(逢希伯-林道氏?。〢nti-MCM3 Antibody染色質(zhì)域解旋DNA結(jié)合蛋白3(CHD3)
栗褐芽孢桿菌神經(jīng)管畸形相關(guān)蛋白VANGL2抗體Anti-MCM5 Antibody染色框同源物3(CBX3)
蘋(píng)果鏈格孢磷化血管擴(kuò)張激磷蛋白抗體Anti-MCM6 Antibody染色框同源物2(CBX2)
枯草芽孢桿菌磷化血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2抗體Anti-MCM5 Antibody染色框同源物1(CBX1)
黑曲霉01群小川型霍亂弧菌抗體Anti-MCM7 Antibody犬尿(KYNU)
葡萄座腔菌囊泡相關(guān)膜蛋白1,2,3抗體Anti-MCM6 Antibody犬尿-3-單加氧(KMO)
擬黑馬朗假絲酵母神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)肽VGF抗體Anti-MCM7 Antibody脫氫3家族成員A1(ALDH3A1)
Bacillus aryabhattai重組豬細(xì)小病VP2蛋白抗體Anti-MCPIP1/ZC3H12A Antibody脫氫1家族成員A2(ALDH1A2)
扁菌血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D型抗體Anti-MCM8 Antibody脫氫1家族成員A1(ALDH1A1)
阿魏側(cè)耳L-型電壓依賴(lài)型鈣通道α抗體Anti-MCUR1 Antibody糖還原相似蛋白1(ARL1)
干燥癥SSB/La抗體李氏放線桿菌大鼠角膜上皮細(xì)胞
核糖核蛋白抗原抗體福賽坦氏菌大鼠角膜成纖維細(xì)胞
豬水腫O139菌體蛋白抗體豬丹毒絲菌大鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞
相關(guān)抗原17抗體人心桿菌大鼠晶狀體上皮細(xì)胞
mTOR抑制劑(Temsirolimus)釀酒酵母 2-溴-1H-咪唑球蟲(chóng)病
赭曲霉 O-苯基-N-叔丁基羰基-L-酪敏感性脂肪
Burkholderia sp. Naltrexone HCl維生C
雜色曲霉 4-芐氧基-2-氟苯脫1
Asticcacaulis? H-Cys(Trt)-NH2熱休克蛋白
中國(guó)農(nóng)大湖積物桿 4-溴水楊病H7亞型抗體
克魯斯假絲酵母 二-d2沙門(mén)氏抗體
N-BOC-4-氧代-L-脯叔丁酯葡萄糖
黑曲霉 雙[(2-二苯膦基)苯基]組織蛋白B
枯斑擬盤(pán)多毛孢 (甲硫基)乙甲酯富含半胱型性蛋白
暗黃紫色小單孢 3-甲硫基丁3-硝基絡(luò)
HLE(人肝癌(未分化)) 噻吩-2-磺酰粘蛋白1
根瘤 2-溴-4,5-二氟粘蛋白2
根瘤 (R)-(-)-1-{(S)-2-[Bis(3,5-di-trifluoromethylphenyl睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子
貝氏隱飽子蟲(chóng) 3-(二苯基膦基)催產(chǎn)