一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(最好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱:西方蜜蜂微孢子蟲熒光定量PCR試劑盒探針法
英文名稱:Nosema apis
貨號(hào):BJ-P9878
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)外包:
基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、使用方法:
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
硝酸纖維素薄膜(NC膜)0.45μm 9cm×10cm20片
硝酸纖維素薄膜(NC膜)0.22μm 9cm×10cm20片
麗春紅染色液(10×)12ml
Western半干法轉(zhuǎn)膜液(固體)(1×干粉)1包
麗春紅染色液(1×)100ml
Western半干法轉(zhuǎn)膜液(固體)(10×干粉)1包
WB轉(zhuǎn)印濾紙(12.5cm×12.5cm,100張/包)100張
PVDF膜(進(jìn)口分裝),0.45μm,13.5cm×10cm,10張/包1包
PVDF膜(進(jìn)口分裝),0.20μm,13.5cm×10cm,10張/包1包
蛋白質(zhì)銀染檢測(cè)試劑40次
西方蜜蜂微孢子蟲熒光定量PCR試劑盒探針法雪貂 CD20 / MS4A-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)組織過氧化氫(HYDROGEN PEROXIDE)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 20次
人 F9 / FIX / Factor IX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)血液過氧化氫(HYDROGEN PEROXIDE)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 20次
人 FST / Follistatin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)體液過氧化氫(HYDROGEN PEROXIDE)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 20次
大鼠 ACE2 / ACEH 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)植物過氧化氫(HYDROGEN PEROXIDE)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 20次
小鼠 EPHB1 / EPHT2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)細(xì)胞二胺氧化(DAO)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
人 LBP / Lipopolysaccharide Binding 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)組織二胺氧化(DAO)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
人 LOXL2 / Lysyl oxidase homolog 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)血液二胺氧化(DAO)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20/50次
人 ILKAP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)體液二胺氧化(DAO)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
人 GOLM1 / GP73 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)細(xì)胞二胺氧化(DAO)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 20次
小鼠 TCN2 / Transcobalamin-II 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)組織二胺氧化(DAO)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 20次
人 BLNK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)血液二胺氧化(DAO)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 20次