服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱:蜜蜂微孢子蟲通用熒光定量PCR試劑盒探針法
英文名稱:Nosema spp.
貨號(hào):BJ-P9880
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)外包:
基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、使用方法:
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲(chǔ)存條件:-20℃以下,有效期12個(gè)月。
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(最好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
雙色蛋白上樣緩沖液4×(變性)1ml×3/1ml×6
SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(非變性)(2×)1ml×6
SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(變性)(2×)1ml×6
SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(變性)(1×)10ml
SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(變性)(5×)1ml×3
SDS-PAGE Tricine蛋白上樣緩沖液2×(變性)1ml×6
微量BCA蛋白質(zhì)定量試劑盒1盒
BSA標(biāo)準(zhǔn)品20ml
Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒1盒
BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒250次/500次/2500次
蜜蜂微孢子蟲通用熒光定量PCR試劑盒探針法小鼠 CFD / Adipsin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)細(xì)胞NADPH氧化活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
小鼠 EREG / epiregulin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)組織NADPH氧化活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
雪貂 CD8A / CD8 alpha chain 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)細(xì)胞過氧化物(peroxidase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
小鼠 PGLYRP / TNFSF3L 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)組織過氧化物(peroxidase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
小鼠 PLA2G2E 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)血液過氧化物(peroxidase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
人 ITGAX & ITGB2 Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)真/酵母過氧化物(peroxidase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
人 ITGA8 & ITGB1 Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)植物過氧化物(peroxidase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
人 ITGA5 & ITGB1 Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)細(xì)胞半胱蛋白-1(PASE-1)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
人 ITGA6 & ITGB1 Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)組織半胱蛋白-1(PASE-1)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 20次
小鼠 CD83 / HB15 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)細(xì)胞半胱蛋白-1(PASE-1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 20次
人 ACPP / PSAP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)組織半胱蛋白-1(PASE-1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 20次