ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產(chǎn)品名稱 | BMP-4大鼠骨成型蛋白4ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Rat Bone morphogenetic protein 4, BMP-4 Elisa Kit |
貨號 | FS-R64701 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
ISLR2蛋白抗體英文全稱receptor tyrosine kinase英文簡稱RTKs檢測范圍5444nmol/L-4000pg/ml
集成復雜蛋白亞單位3抗體英文全稱interferon-inducible protein 8英文簡稱IP-8檢測范圍5445nmol/L-80pg/mL
肌苷單磷酸脫氫酶1抗體英文全稱calcitonin gene related peptide receptor英文簡稱CGRPR檢測范圍5446nmol/L-
磷酸化白細胞介素-7受體a抗體英文全稱TAK1英文簡稱TAK1檢測范圍5447nmol/L-2000pg/ml
磷酸化胰島素受體底物2抗體英文全稱progestrone receptor英文簡稱PR檢測范圍5448nmol/L-2000pg/ml
磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體英文全稱GEF英文簡稱GEF檢測范圍5449nmol/L-20ng/ml
磷酸化整合素連接激酶1抗體英文全稱Complement C1q tumor necrosis factor-related protein 3英文簡稱C1QTNF3檢測范圍5450nmol/L-8ng/ml
磷酸化胰島素受體底物1抗體英文全稱Protoporphyrin IX英文簡稱Protoporphyrin IX檢測范圍5451nmol/L-8ng/mL
磷酸化細胞間粘附分子1抗體英文全稱Coxsackievirus英文簡稱COX檢測范圍5452nmol/L-
磷酸化整合素β3抗體英文全稱Galactocerebroside antibody英文簡稱GALC-Ab檢測范圍5453nmol/L-160ng/ml
磷酸化胰島素樣生長因子1受體抗體英文全稱cyclic citrullinated peptide antibody英文簡稱CCP-Ab檢測范圍5454nmol/L-200IU/ml
磷酸化胰島素受體β抗體英文全稱nti-perinuclear factorantibody英文簡稱APF-Ab檢測范圍5455nmol/L-400ng/ml
核因子κB抑制蛋白E抗體英文全稱Recombinant Drebrin 1英文簡稱DBN1檢測范圍5456nmol/L-400pg/ml
磷酸化整合素β4抗體英文全稱hexosaminidase英文簡稱Hex檢測范圍5457nmol/L-400ng/ml
干擾素α受體抗體英文全稱organic anion transporting2英文簡稱OAT2檢測范圍5458nmol/L-20ng/mL
磷酸化干擾素α受體抗體英文全稱Creatinine英文簡稱Creatinine檢測范圍5459nmol/L-8mmol/L
人白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 Phospho-Chk2 (Ser33/35) Antibody100 ul
人白介素受體相關激酶(IRAK)ELISA試劑盒 Phospho-Chk2 (Ser19) Antibody20 ul
人白介素9(IL-9)ELISA試劑盒Phospho-Chk2 (Ser19) Antibody100 ul
人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒 Phospho-Chk2 (Ser516) Antibody20 ul
人白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 Phospho-Chk2 (Ser516) Antibody100 ul
人白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒AS160 (C69A7) Rabbit mAb500 ul
人白介素4(IL-4)ELISA試劑盒SimpleChIP® Human MEF2A Exon 1 Primers100 ul
人白介素3(IL-3)ELISA試劑盒HERPUD1 Antibody100 ul
BMP-4大鼠骨成型蛋白4ELISA試劑盒實驗原理人N-乙酰-β-D-氨葡萄糖苷酶(NAG)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Enterobacter aerogenes
鼠N-乙酰-β-D-氨葡萄糖苷酶(NAG)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: perfringens Type C
大鼠N-乙酰-β-D-氨葡萄糖苷酶(NAG)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: coli
雞17-類固(17-KS)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Rhizopus formosensis
人17-類固(17-KS)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Streptomyces noursei
鼠17-類固(17-KS)ELISA Kit,48T/96T 用途: 用作生物防治研究
大鼠17-類固(17-KS)ELISA Kit,48T/96T 用途: 害蟲生物防治
魚類白介素1α(IL-1α)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準