一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(最好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱:貓嗜衣原體熒光定量PCR試劑盒探針法
英文名稱:Chlamydophila felis
貨號:BJ-P9406
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)外包:
基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、使用方法:
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
營養(yǎng)肉湯(日本標(biāo)準(zhǔn)) Nutrient Broth(Japan) 250g
100g DNHEPES(乙硫磺酸)
2 ug pGADT7Rec pGADT7Rec 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基(SS) Salmonella-Shigella 250g
1瓶 CCRF-CEM細(xì)胞株 CCRF-CEM 低溫運(yùn)輸和保存
哥倫比亞血瓊脂平板(9cm) Columbia Blood Agar 5個(gè)/包
25000U T7 RNA聚合 T7 RNA Polymerase -20℃保存
4000mL Phosphate Buffered Saline,10X (for blot washing) Phosphate Buffered Saline,10X (for blot washing) 常溫保存
250g 干粉型SB培養(yǎng)基 SB Medium Powder 常溫
2 ug pOTB7 STIP1 pOTB7 STIP1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
生化管 20支/盒
貓嗜衣原體熒光定量PCR試劑盒探針法大鼠 PRL4A1 基因全長ORF克隆大鼠丙酮酸激M2型同工(M2-PK)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
大鼠 OAT 基因全長ORF克隆大鼠丙二酸單酰輔A脫羧(MLYCD)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
大鼠 CDKN2AIPNL 基因全長ORF克隆大鼠丙二酸單酰輔A(malonyl CoA)免疫試劑盒*直銷
大鼠 KCNA10 基因全長ORF克隆大鼠丙二醛(MDA)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
大鼠 MYL12A 基因全長ORF克隆大鼠丙氨基轉(zhuǎn)移(ALT)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
大鼠 FGG 基因全長ORF克隆大鼠別孕烯醇酮/3α,5α-四氫孕酮(AP/3α,5α-THP)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
大鼠 TRIP4 基因全長ORF克隆大鼠表皮生長因子受體(EGFR)免疫試劑盒*直銷
大鼠 KRT15 基因全長ORF克隆大鼠表皮生長因子(EGF)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
大鼠 ERAP1 基因全長ORF克隆大鼠胞外銅鋅超氧化物歧化(Cu/Zn-SOD/SOD3)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
大鼠 MCM7 基因全長ORF克隆大鼠胞漿型磷脂A2(cPLA2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
大鼠 METTL1 基因全長ORF克隆大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)免疫試劑盒*直銷