ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | ICA大鼠胰島細胞抗體ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Rat islet cell antibody, ICA Elisa Kit |
貨號 | FS-R64486 |
公司“質量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
20號染色體開放閱讀框27抗體英文全稱angiotension Ⅶ英文簡稱Ang-Ⅶ檢測范圍1780nmol/L-640pg/mL
腫瘤壞死因子受體超家族成員5抗體英文全稱CXC-chemokine ligand 10英文簡稱CXCL10檢測范圍1781nmol/L-2000pg/mL
20號染色體開放閱讀框70抗體英文全稱Aldehyde Oxidase 1英文簡稱AOX1檢測范圍1782nmol/L-20ng/mL
型乙酰膽堿受體B2抗體英文全稱Soluble CD276,sCD276;sB7-H3英文簡稱sCD276;sB7-H3檢測范圍1783nmol/L-200ng/mL
20號染色體開放閱讀框74抗體英文全稱Large Multifunctional Peptidase 7英文簡稱LMP7檢測范圍1784nmol/L-20ng/mL
20號染色體開放閱讀框132抗體英文全稱Large Multifunctional Peptidase 2英文簡稱LMP2檢測范圍1785nmol/L-8ng/mL
IV型膠原蛋白/4型膠原蛋白/膠原蛋白4抗體英文全稱Fragile X Mental Retardation 1英文簡稱FMR1檢測范圍1786nmol/L-20ng/ml
親環(huán)蛋白PPIB抗體英文全稱Semaphorin 4D英文簡稱SEMA4D檢測范圍1787nmol/L-2000pg/mL
鈣反應因子抗體英文全稱elastase 2, neutrophil英文簡稱ELA2檢測范圍1788nmol/L-400ng/mL
畸胎瘤衍化生長因子單克隆抗體(C端)英文全稱CYP19英文簡稱CYP19檢測范圍1789nmol/L-200U/L
CHX10蛋白抗體英文全稱Small Dense Low Density Lipoprotein英文簡稱sdLDL檢測范圍1790nmol/L-20nmol/ml
鈣調蛋白激酶CaMK1D抗體英文全稱matriptase-2英文簡稱MTSP2檢測范圍1791nmol/L-20ng/mL
細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑2C抗體英文全稱Inositol Triphosphate英文簡稱IP4檢測范圍1792nmol/L-6000pg/mL
Cullin2抗體英文全稱Interleukin 5 Receptor Alpha英文簡稱IL-5Rα檢測范圍1793nmol/L-4000pg/mL
細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑2B抗體英文全稱Interleukin 3 Receptor Alpha英文簡稱IL-3Rα檢測范圍1794nmol/L-20ng/mL
泛素連接酶蛋白CHFR抗體英文全稱epidermal basement membrane zone英文簡稱EBMZ檢測范圍1795nmol/L-20ng/mL
大鼠細胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒SOD2 (D3X8F) XP® Rabbit mAb20 ul
大鼠細胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒SOD2 (D3X8F) XP® Rabbit mAb100 ul
大鼠細胞色素P4502E1(CYP2E1)ELISA試劑盒 Neurogenin 2 (D2R3D) Rabbit mAb100 ul
大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (197G2) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul
大鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒VAMP1 Antibody1 Kit
大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒PathScan® Phospho-Rb (Ser807/811) Sandwich ELISA Kit100 ul
大鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒Phospho-Atg14 (Ser29) Antibody100 ul
大鼠細胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒NLRP3 (D2P5E) Rabbit mAb100 ul
ICA大鼠胰島細胞抗體ELISA試劑盒實驗原理肌側索硬化癥相關蛋白FGGY抗體Prosapogenin A別名: Ophiopogonin C'分子式: C39H62O12性狀: Powder純度: 特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產物;天然產物庫
肌側索硬化癥相關蛋白FIG4抗體Sprengerinin C別名: 分子式: C44H70O16性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 植物提取物;天然產物;天然產物庫
黃素腺嘌呤二核苷抗體Sprengerinin A別名: 分子式: C38H60O12性狀: Powder純度: 特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 植物提取物;天然產物;天然產物庫
甲酰肽受體3抗體(脂氧素A4受體)2''-O-Acetylsprengerinin C別名: 分子式: C46H72O17性狀: Powder純度: 特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 植物提取物;天然產物;天然產物庫
兜甲蛋白抗體Dioscin別名: 分子式: C45H72O16性狀: Powder純度: 98.5%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 溶血;;抗真菌;薯蕷屬;螺甾烷;中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產物;天然產物庫
脂肪堆積和肥胖相關蛋白抗體Thevetin B別名: 分子式: C42H66O18性狀: Powder純度: 97.5%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產物;天然產物庫
鳥嘌呤核苷交換因子FARP2抗體6,7-Dihydroneridienone A別名: 分子式: C21H28O3性狀: Powder純度: 特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 植物提取物;天然產物;天然產物庫
FK506結合蛋白相關蛋白抗體(他克莫司相關蛋白)Dregeoside A11別名: 分子式: C55H88O22性狀: Powder純度: 特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 植物提取物;天然產物;天然產物庫
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準