一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(最好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱:曼那角病毒PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Menangle virusRTPCR
貨號(hào):BJ-P6972
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)外包:
基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、使用方法:
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲(chǔ)存條件:-20℃以下,有效期12個(gè)月。
10g 1:10000 Pepsin 1:10000 室溫保存 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Phospholipase A2
50T 豬藍(lán)耳病病毒(高致病性)PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存LB營(yíng)養(yǎng)瓊脂 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)LB Nutrient Agar用于細(xì)菌培養(yǎng)250
10塊 LB平板培養(yǎng)基(無(wú)抗生素) LB Petri Dish 低溫 0.78-50 ng/mL 人腺苷脫氨樣蛋白(Adenosine deaminase-like protein)ELISA試劑盒
TSA表面接觸皿55mm 10個(gè)每包 15.6-1000 pg/mL 人可溶性蛋白185(sp185/HER-2/neu/c-erbB-2)ELISA試劑盒
50次 DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)(100-5000bp) DNAMETER 4℃保存
100mL Bis-Tris Propane,0.2M,pH7.4 Bis-Tris Propane,0.2M,pH7.4 常溫保存甲基紅指示劑盒進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)用于甲基紅試驗(yàn)配套試劑10ml*1
2 ug pBlueScriptR PPP2R5 B pBlueScriptR PPP2R5 B 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人受體1(FOLR1)ELISA試劑盒
BCP寒天培地(含瓊脂) BCP Medium 250gEF-18 瓊脂進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)EF-18 Agar用于濾膜法檢測(cè)食品中沙門氏菌(SN/T1059.1)250
1g 次 Hypoxanthine 室溫保存 0.312-20 ng/mL. ELISA Kit for Human Tetraspanin-14
500mL Blotto in TBS with azide Blotto in TBS with azide 常溫保存 3.12-200 ng/mL 人分裂周期因子42(CDC42)ELISA試劑盒
500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH6.0 Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH6.0 常溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human C-X-C motif chemokine 11
曼那角病毒PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒Cot inhibitor-2 COT/Tpl2抑制劑(Cot inhibitor-2) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
3PO 小分子PFKFB3同工酶抑制劑(3PO) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
HS-173 PI3K抑制劑(HS-173) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg
2-Cl-IB-MECA A3adenosine受體激動(dòng)劑(2-Cl-IB-MECA) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
CCT244747 CHK1抑制劑(CCT244747) 1mL(10mM)|2mg|5mg
Apoptozole Hsp70抑制劑(Apoptozole) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
BQU57 Ral抑制劑(BQU57) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Asciminib 變構(gòu)Bcr-Abl抑制劑(Asciminib) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
BI-9564 BRD9BD抑制劑(BI-9564) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
Naquotinib mesylate EGFR突變體抑制劑(Naquotinib mesylate) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg
NU6300 CDK2抑制劑(NU6300) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg