服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
轉(zhuǎn)基因玉米品系CBH351核酸檢測試劑盒 | 熒光探針法 | FS-P10743 |
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
腸桿菌屬培養(yǎng)基: 141模式菌株: no葉面提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 30 定期移植法
-1540℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
釀酒酵母培養(yǎng)基: 0013美國通用的活性干酵母菌提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
AS4.364培養(yǎng)基: 12模式菌株: no種屬: Streptomyces│griseoviridans提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ 真空冷凍干燥法
AS1.196致病菌芯片模式菌株: no種屬: Bacillus│cereus提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 2生長條件: 30.0℃
紫紅曲霉培養(yǎng)基: 776模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ 真空冷凍干燥法
ACCC30501=CBS109.07分類學(xué)研究。模式菌株: yes種屬: Monascus│purpureus提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 25-28℃
暗黑鏈霉菌培養(yǎng)基: 0012模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-1541℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
海洋棒桿菌模式菌株模式菌株: yes海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0223生長條件: 28℃
假單胞菌 -80℃冰箱凍結(jié)法生長條件: 37℃提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no培養(yǎng)基: 33
花生根瘤菌生長條件: 28℃培養(yǎng)基: 545提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法
炭角菌屬產(chǎn)生抗菌活性物質(zhì),抗藤黃八疊球菌模式菌株: noPhaeophyscia提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 25C
嗜松青霉生長條件: 25℃培養(yǎng)基: 0015提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
O1群霍亂弧菌培養(yǎng)基: CM0116O1/classical 稻葉(Inaba)提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no生長條件: 37℃ 真空冷凍干燥法
-1542℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
龍血素Bphospho-GSK-3 Beta(pSer9) 磷化葡萄糖合成激酶-3β抗原TSPAN5 四分子交聯(lián)體5抗體(四旋蛋白)
原蘇木素B; 原巴西蘇木素phospho-GSK3 Alpha/ Beta(alpha + beta)(phospho Tyr279 + Tyr216) 磷化葡萄糖合成激酶3α/β抗原TSPAN4 四分子交聯(lián)體4抗體(四旋蛋白)
辛夷脂素GSR/GRase(glutathione reductase) 谷胱甘肽還原酶抗原TSPAN3 四分子交聯(lián)體3抗體(四旋蛋白)
烏藥內(nèi)酯A/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human) A型人流感病H1N1-M2蛋白多肽TSPAN20/UPIb 四分子交聯(lián)體20抗體(四旋蛋白)
漆黃素非瑟酮/紫鉚素A/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine) A型豬流感病H1N1-M2蛋白TSPAN2 四分子交聯(lián)體2抗體(四旋蛋白)
丹皮酚原苷牡丹酚原甙H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病A抗原TSPAN17/FBX23 四分子交聯(lián)體17抗體(四旋蛋白)
苦玄參苷ⅠBH1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病A抗原TSPAN16/TM4-B 四分子交聯(lián)體16抗體(四旋蛋白)
蘆薈苷H2AX peptide 組蛋白H2AX多肽抗原TSPAN15/NET-7 四分子交聯(lián)體15抗體(四旋蛋白)
白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ;蒼術(shù)內(nèi)酯IH1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病A抗原TSPAN14 四分子交聯(lián)體14抗體(四旋蛋白)
白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ;蒼術(shù)內(nèi)酯IIH1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病A抗原TSPAN13/NET-6 四分子交聯(lián)體13抗體(四旋蛋白)
轉(zhuǎn)基因玉米品系CBH351核酸檢測試劑盒SaxagliptinHCL 沙格列汀/沙克列汀鹽鹽 質(zhì)量規(guī)格:>98%
EGCG,(-)-Epigallocatechingallate/GreenTeaExtract 表沒食子兒茶素沒食子酯(EGCG95%) 質(zhì)量規(guī)格:>98%
DasatinibMonohydrate 達沙替尼一水合物 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Exemestane(USP) 依西美坦 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Exemestane 依西美坦(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Amidopyrine/aminopyrine 氨基比林 質(zhì)量規(guī)格:>98%
AngiotensinII 血管緊張素II 質(zhì)量規(guī)格:>98%
VitaminD3 維生素D3((膽骨化醇) 質(zhì)量規(guī)格:>98%
PazopanibHCl 帕唑帕尼鹽鹽 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Tiotropiumbromideanhydrous 噻托銨 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Formoterolfumarate 富馬福莫特羅(二水) 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Formoterolfumarate 富馬福莫特羅(無水) 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Faropenemsodium 法羅培南(鈉)(2.5水) 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Faropenemsodium 法羅培南鈉(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Orlistat(synthesis) 奧利司他 質(zhì)量規(guī)格:>98%
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。