GCDH葡萄糖脫氫酶檢測試劑盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品：5058-13-9標(biāo)準(zhǔn)品細(xì)胞谷草酰乙轉(zhuǎn)（GOT）活性光譜法定量檢測試劑盒
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產(chǎn)品名稱：GCDH葡萄糖脫氫酶檢測試劑盒微量法
規(guī)格：100管/96樣
檢測方法：微量法
貨號：FS-01S63645
商品介紹：
測定意義 GCDH（EC 1.1.1.47）催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H，大量存在于高等動(dòng)物的肝臟和弱氧化醋桿菌中。在低聚果糖中使用GCDH，不僅能去除低聚果糖中的葡萄糖提高低聚果糖的含量，而且生成的葡萄糖酸與鈣離子結(jié)合生成的葡萄糖酸是一種理 想的補(bǔ)鈣制劑。因而，GCDH已成為制備高含量低聚果糖的理想用酶。 測定原理： GCDH催化D-葡萄糖和NAD生成D-葡萄糖酸和NADH，在340nm下測定NADH上升速率，即可反映GCDH活性。 需自備的儀器和用品： 紫外分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。 4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。 7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。 |
粗酶液提取：
1、細(xì)胞或組織樣品的制備： 培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。 2、血清（漿）樣品：直接檢測。 |
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；
試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
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GCDH葡萄糖脫氫酶檢測試劑盒微量法異丁基鋰 1.6M 正己烷溶液2-基-3-甲基吡 95%Anti-Annexin I/FITC 熒光標(biāo)記人、大、小鼠膜粘連蛋白 I抗體IgG
（基硅烷）甲基化鋰 0.56 M in hexanes核黃-5′-磷鈉鹽水合物 73-79%(HPLC)Anti-Annexin II/FITC 熒光標(biāo)記膜粘連蛋白-2抗體IgG
基鋁 2.0 M 甲溶液核黃磷鈉 93%Anti-Annexin III /FITC 熒光標(biāo)記膜粘連蛋白 Ⅲ抗體IgG
3-溴甲 98%核黃磷鈉 USP級Anti-Annexin IV /FITC 熒光標(biāo)記膜粘連蛋白 Ⅳ抗體IgG
2,5-二溴甲 96%鹽去氧腎上腺 98%Anti-Annexin V/FITC 熒光標(biāo)記重組膜粘連蛋白-5(人)抗體IgG
對氟甲 98%醋氯己定 98%Anti-Annexin VI/FITC 熒光標(biāo)記膜粘連蛋白 VI抗體IgG
對氟甲 99%,升華純化鹽洗必泰 96%Anti-Anopheles stephensi protein 1/FITC 熒光標(biāo)記按蚊抗體IgG
3-氟甲 98%薯蕷皂 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>95%Anti-ANP/FITC 熒光標(biāo)記抗心鈉肽（心鈉）抗體IgG
