實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
嗜人錐蠅PCR熒光定量檢測試劑盒 | Cochliomyia hominivoraxPCR | 多種規(guī)格 | BJ-P6603 |
特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
儲存條件：-20℃以下，有效期12個月。
二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 １．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。 ２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。 ３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。 ４．PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 ５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。 ６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。 ７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
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操作流程
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH8.2 Tris-HCl Buffer,1.0M,pH8.2 常溫保存乙酰胺紅瓊脂進口、國產(chǎn)Acetamide Agar250克測定綠膿桿菌色素分離、培養(yǎng)
大豆酪蛋白瓊脂（TSA）培養(yǎng)基平板9cm TSA 10個/包 0.312-20 ng/mL 人血管緊張素轉(zhuǎn)化(ACE)ELISA試劑盒
2 ug pMXB10 pMXB10 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 甲型流感病毒H1亞型(IAV-H1)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
250mL Beta-ME-EDTA Solution（beta-EDTA溶液） Beta-ME-EDTA Solution 常溫保存 0.78-50 ng/mL 人胰島再生源蛋白3 - alpha(REG-3-alpha)ELISA試劑盒
50T 兔黏液瘤病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL (Cortisol)ELISA試劑盒
1g 纖維素 Cellulase From Aspergillus Niger 4℃保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human C-C motif chemokine 27
2 ug pBiFC-bFosVC155 pBiFC-bFosVC155 低溫運輸，-20℃保存牛心浸粉進口、國產(chǎn)Beef Heart Infusion培養(yǎng)基原材料，提供豐富的營養(yǎng)成份100
250mL MOPS Buffer,1.0M,pH7.4 MOPS Buffer,1.0M,pH7.4 常溫保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Early growth response protein 1
50T 大腸桿菌(O1)PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
250mL Dialysis Tubing Wash Buffer（透析袋洗滌液），5X Dialysis Tubing Wash Buffer，5X 常溫保存 3.12-200 ng/mL 山羊痘(GPV)核酸檢測試劑盒
5次 PCR法DNA探針辛標記試劑盒 PCR DNA Labeling Kit Series -20℃保存 15.6-1000 pg/mL 人催乳素(PRL)ELISA試劑盒
嗜人錐蠅PCR熒光定量檢測試劑盒沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（SDA）（2015藥典） 英文名稱：Sabouraud Dextrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
緩沖動力-硝酸鹽培養(yǎng)基 英文名稱：Buffered Power - nitrate medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
豬骨成型蛋白7(BMP7)免疫試劑盒進口、組裝
小鼠葡萄糖激(GCK)免疫試劑盒進口、分裝
小鼠白介素13(IL-13)免疫試劑盒進口、分裝
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人可溶性CD21(CR2/sCD21)免疫試劑盒*直銷
人廣州管園線蟲抗體(IgM)免疫試劑盒*直銷
人6酮前列腺素(6-K-PG)免疫試劑盒進口、分裝
