實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
葡萄狀穗霉屬通用PCR熒光定量檢測試劑盒 | Stachybotrys spp.PCR | 多種規(guī)格 | BJ-P7321 |
特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
儲存條件：-20℃以下，有效期12個月。
二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 | 三、注意事項 １．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。 ２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。 ３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。 ４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。 ５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。 ６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。 ７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。
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操作流程
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 所有試劑在使用應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
Rhizoma gastrodiae天麻PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周DP1/TFDP1 轉(zhuǎn)錄因子DP1抗體 規(guī)格: 0.1mlHMGCS1 三羥基三甲基輔A合成1 規(guī)格: 0.2ml
Human Papillomavirus 13(HPV-13)人瘤病毒13 LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周streptomycin 素抗體 規(guī)格: 0.2mlCYP11B1 P450 11B1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Human Immunodeficiency Virus 1(HIV-1M-J)人免疫缺陷病毒1型M群J型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周CMYA2/PDE4DIP 心肌相關(guān)蛋白2 規(guī)格: 0.2mlPGLS 磷酸葡萄糖酸內(nèi)酯抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rhizoma dioscoreae hypoglaucae粉萆薢探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周CCDC12 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體 規(guī)格: 0.2mlbeta-Amyloid(25-35) β淀粉樣肽（25-35）抗體 規(guī)格: 0.1ml
Xylella fastidiosa苛養(yǎng)木桿LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周CK5+6 細(xì)胞角蛋白5+6抗體 規(guī)格: 0.1mlHPGD/PGDH1/Prostaglandin dehydrogenase 1 前列素脫1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Salmonella montevideo蒙得維的沙門氏探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Rabbit Anti-chicken IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml
Flos albiziae合歡花探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周MMS2/EDPF1 腸細(xì)胞分化相關(guān)因子1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Enterovirus(EV)腸道病毒D組RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周Shadow/shadow of prion protein 新朊蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Psoroptes spp. 癢螨通用探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周MMP-1 基質(zhì)金屬蛋白-1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Grapevine flavescence dorée phytoplasma葡萄金黃化植原體PCR試劑盒 植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-3周DUSP26/MKP8 雙特異性蛋酸26抗體（絲裂原活化蛋白激磷酸8） 規(guī)格: 0.2ml
葡萄狀穗霉屬通用PCR熒光定量檢測試劑盒蔗糖酶測試盒(微量法) 100管/48樣
蔗糖酶測試盒(可見分光光度法) 50管/24樣
蔗糖合成酶(SS)測試盒(微量法) 100管/48樣
細(xì)胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(B-AI)測試盒(微量法) 100管/48樣
細(xì)胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(B-AI)測試盒(可見分光光度法) 50管/24樣
血糖含量測試盒(微量法) 100管/96樣
血糖含量測試盒(可見分光光度法) 50管/48樣
植物可溶性糖含量測試盒(微量法) 100管/96樣
植物可溶性糖含量測試盒(可見分光光度法) 50管/48樣
糖原含量測試盒(微量法) 100管/96樣
糖原含量測試盒(可見分光光度法) 50管/48樣
