中文名稱：DH5α 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100品牌
規(guī)格：100ul*100
用途：生化試劑。（用于科研試驗研究）
儲存條件: -70℃保存，必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個月。
外觀:（性狀） 干冰運輸，單加10kg干冰費
單位: 袋
使用說明：
1． DH5α 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100品牌取100 μl感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中融化。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30min。
3． 42℃熱擊45sec，然后快速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3min，該過程不要搖動離心管。
4．每個離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床， 150 rpm振蕩培養(yǎng)45～60min使菌體復(fù)蘇。
5． 根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12~16h。
培養(yǎng)方法：
DH5α 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100品牌收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細(xì)胞生長情況，如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
培養(yǎng)實驗又要開始了，科研工作者又該忙碌了，大家可能都在尋找適合自己的細(xì)胞，不用急，我們幫您掌舵，讓您滿意！
傳代方法：細(xì)胞*匯合時，倒掉舊液，加入消化液（0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA）2ml消化，顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個細(xì)胞后棄掉胰酶，加培養(yǎng)基混勻分瓶，T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml，T75瓶加培養(yǎng)基至20ml，37℃，5%CO2孵箱培養(yǎng)。
ICA ELISA Kit 磷酸化雄激素受體抗體 胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒
IAA ELISA Kit 磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗體 胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒
PI ELISA Kit 磷酸化蛋白激酶B抗體 胰島素原(PI)ELISA試劑盒
INSL3 ELISA Kit 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 胰島素樣因子3(INSL3)ELISA試劑盒
IGFBP7/MAC25/PSF ELISA Kit 凋亡相關(guān)蛋白3抗體 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7(IGFBP7/MAC25/PSF)ELISA試劑盒
IGFBP-5 ELISA Kit 自噬相關(guān)蛋白18抗體 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)ELISA試劑盒
IGFBP-4 ELISA Kit 自噬相關(guān)蛋白4A抗體 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒
IGFBP-3 ELISA Kit 載脂蛋白A4抗體 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒
IGFBP2 ELISA Kit 12脂氧合酶抗體 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA試劑盒
IGFBP-1 ELISA Kit 血管緊張素III抗體 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒
IGFBP-3 ELISA Kit 腺苷酸環(huán)化酶3抗體 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋3(IGFBP-3)ELISA試劑盒
IGFBP-2 ELISA Kit 血管動蛋白抗體 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋2(IGFBP-2)ELISA試劑盒
IGFBP-1 ELISA Kit 腺病毒早期E1A蛋白抗體 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋1(IGFBP-1)ELISA試劑盒
IGF-2R ELISA Kit 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 胰島素樣生長因子2受體(IGF-2R)ELISA試劑盒
IGF-2 ELISA Kit 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒
豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫試劑盒 ARNT2 芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白2抗體
豬血小板衍生生長因子(PDGF)免疫試劑盒 ABH8 AlkB同源蛋白8抗體
豬血小板活化因子(PAF)免疫試劑盒 ABI3BP ABI基因家族成員3結(jié)合蛋白抗體
豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒 ARHGAP20 Rho GTP酶激活蛋白20抗體
豬血栓素A2(TXA2)免疫試劑盒 ASB10 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族10抗體
豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)免疫試劑盒 ALDH1L1 乙醛脫氫酶1蛋白家族L1抗體
豬血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒 Axin 2 軸抑制蛋白2抗體
豬血漿激肽釋放酶(KLKB1)免疫試劑盒 ANGPTL6 血管生成素相關(guān)蛋白6抗體
豬血紅蛋白(Hb)免疫試劑盒 AMH Muellerian繆勒管激素抑制因子抗體
豬血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)免疫試劑盒 EphA8 酪氨酸蛋白激酶受體A8抗體
豬血管舒緩激肽(BK)免疫試劑盒 Acetoacetyl-CoA synthetase 脂肪酰輔酶A家族成員1抗體
豬血管生成素2(ANG-2)免疫試劑盒 ARNTL2 芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣2抗體
豬血管生成素1(ANG-1)免疫試劑盒 phospho-AANAT (Thr29) 磷酸化芳香胺N-乙?；D(zhuǎn)移酶抗體
豬血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1)免疫試劑盒 ABLIM1 肌動蛋白結(jié)合蛋白1抗體
豬血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)免疫試劑盒 AMIGO2 粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體
豬血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)免疫試劑盒 Advillin 肌動蛋白結(jié)合蛋白DOC6抗體
豬血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)免疫試劑盒 AFG3L2 AFG3樣蛋白2/脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白28抗體
DH5α 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100品牌豬血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)免疫試劑盒 AIP1 激活素受體相互作用蛋白1抗體
豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒 AKR7A2 醛固酮類還原酶家族7成員A2抗體
豬血管活性腸肽(VIP)免疫試劑盒 AKT1+2+3 蛋白激酶AKT1,2,3抗體
操作方法：
一 、DH5α 感受態(tài)細(xì)胞100ul*100品牌熱激轉(zhuǎn)化法
1. 從-80℃冰箱取出感受態(tài)細(xì)胞冰浴融化后，吸取100μl感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)移到-20℃過夜預(yù)冷的搖菌管中，加入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物，輕輕混勻，冰浴30分鐘。
2. 42℃水浴熱激60秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，該過程不要搖動搖菌管。
3. 向搖菌管中加入900μl 37℃溫浴的SOC或LB（SOC培養(yǎng)基可提高2-3倍轉(zhuǎn)化效率），37℃、180rpm、45分鐘復(fù)蘇菌種。
4. 根據(jù)實驗要求（質(zhì)粒，重組連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化），吸取不同體積已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞加到含相應(yīng)抗生素的LB瓊脂培養(yǎng)基上，將細(xì)胞均勻涂開。將平板置于37℃至液體被吸收，倒置平 板，37℃過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
二、10分鐘快速轉(zhuǎn)化法
注：在使用卡那霉素，四環(huán)素等作為篩選抗性時，需要在SOC培養(yǎng)基中復(fù)蘇以提高轉(zhuǎn)化效率，當(dāng)使用氨芐青霉素作為篩選抗性時，該步驟可以省略。感受態(tài)細(xì)胞-DNA混合物在冰上孵育5-10分鐘后加入4倍體積的37℃溫浴的SOC培養(yǎng)基，在37℃ 180rpm孵育1小時，然后轉(zhuǎn)移到37℃預(yù)熱的LB培養(yǎng)基上。
1. 提前15分鐘將用到的篩選培養(yǎng)基平板拿到37℃預(yù)熱。
2. DH 5α感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA并用手EP管底輕輕混勻，冰中靜置5分鐘。
3. 用200μl槍將感受態(tài)細(xì)胞-DNA混合物轉(zhuǎn)移到已經(jīng)37℃預(yù)熱的LB培養(yǎng)基上，涂均勻，表面無水漬。
4. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
