本公司供應(yīng)的DH5α 感受態(tài)細胞100ul*100品牌細胞,提供售前售后一條龍服務(wù),若要獲取詳細產(chǎn)品名稱的說明書或價格信息,點擊了解更多公司產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱:DH5α 感受態(tài)細胞100ul*100品牌
包裝:100ul*100
分類:克隆感受態(tài)細胞
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.DH5α 感受態(tài)細胞100ul*100品牌研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。
操作方法:
1. DH5α 感受態(tài)細胞100ul*100品牌從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富,可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃,225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時,30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化control pUC19計算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
N-乙酰-DL-色氨酸 N-Acetyl-DL-tryptophan 87-32-1 其他生化試劑
N-乙酰-DL-色氨酸 N-Acetyl-DL-tryptophan 87-32-1 其他生化試劑
N-乙酰-DL-色氨酸 N-Acetyl-DL-tryptophan 87-32-1 其他生化試劑
N-乙酰-DL-色氨酸 N-Acetyl-DL-tryptophan 87-32-1 維生素類
堿性橙 14 Basic Orange 14 10127-02-3 維生素類
堿性橙 14 Basic Orange 14 10127-02-3 維生素類
堿性橙 14 Basic Orange 14 10127-02-3 維生素類
4-乙酰苯硼酸 4-Acetylphenylboronic acid 149104-90-5 維生素類
4-乙酰苯硼酸 4-Acetylphenylboronic acid 149104-90-5 維生素類
4-乙酰苯硼酸 4-Acetylphenylboronic acid 149104-90-5 維生素類
N-乙酰神經(jīng)氨酸 (唾液酸) N-Acetylneuraminic acid 131-48-6 維生素類
N-乙酰神經(jīng)氨酸 (唾液酸) N-Acetylneuraminic acid 131-48-6 維生素類
N-乙酰神經(jīng)氨酸 (唾液酸) N-Acetylneuraminic acid 131-48-6 維生素類
N-乙酰神經(jīng)氨酸 (唾液酸) N-Acetylneuraminic acid 131-48-6 維生素類
5-氮雜胞嘧啶核苷 5-Azacytidine 320-67-2 維生素類
5-氮雜胞嘧啶核苷 5-Azacytidine 320-67-2 維生素類
5-氮雜胞嘧啶核苷 5-Azacytidine 320-67-2 維生素類
2-氨基 2-Aminobenzaldehyde 529-23-7 維生素類
2-氨基 2-Aminobenzaldehyde 529-23-7 維生素類
蒽醌 Anthraquinone 84-65-1 維生素類
蒽醌 Anthraquinone 84-65-1 維生素類
乙酰氧基乙酰氯 Acetoxyacetyl chloride 13831-31-7 維生素類
乙酰氧基乙酰氯 Acetoxyacetyl chloride 13831-31-7 維生素類
乙酰氧基乙酰氯 Acetoxyacetyl chloride 13831-31-7 維生素類
乙酰氧基乙酰氯 Acetoxyacetyl chloride 13831-31-7 維生素類
AMOT ELISA Kit 磷酸化蛋白激酶AKT1抗體 血管動蛋白(AMOT)ELISA試劑盒
Trichinella Ab ELISA Kit 乙醛脫氫酶2型抗體 旋毛蟲抗體(Trichinella Ab)ELISA試劑盒
BrdU ELISA Kit γ-氨基丁酸醛脫氫酶抗體 溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA試劑盒
ASD ELISA Kit 衰老相關(guān)蛋白5抗體 雄烯二酮(ASD)ELISA試劑盒
AR ELISA Kit 磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體 雄激素受體(AR)ELISA試劑盒
ABP ELISA Kit 釉基質(zhì)蛋白抗體 雄激素結(jié)合蛋白(ABP)ELISA試劑盒
TD-Ag ELISA Kit 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體 胸腺依賴性抗原(TD-Ag)ELISA試劑盒
TP-5 ELISA Kit 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體 胸腺五肽(TP-5)ELISA試劑盒
Thymosin β4 ELISA Kit 磷酸化雄激素受體抗體 胸腺肽β4(Thymosin β4)ELISA試劑盒
Thymosin α1 ELISA Kit 磷酸化雄激素受體抗體 胸腺肽α1(Thymosin α1)ELISA試劑盒
Thymosin ELISA Kit 磷酸化雄激素受體抗體 胸腺肽(Thymosin)ELISA試劑盒
TP ELISA Kit 磷酸化雄激素受體抗體 胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA試劑盒
TSLP ELISA Kit 錨定蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白激酶ANKK1抗體 胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素(TSLP)ELISA試劑盒
TARC/CCL17 ELISA Kit 磷酸化內(nèi)收蛋白抗體 胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒
TI-Ag ELISA Kit 膜粘連蛋白11抗體 胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)ELISA試劑盒
TECK/CCL25 ELISA Kit 膜粘連蛋白13抗體 胸腺表達趨化因子(TECK/CCL25)ELISA試劑盒
TLa ELISA Kit 磷酸化促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH抗體 胸腺白血病抗原(TLa)ELISA試劑盒
BRAK/CXCL14 ELISA Kit 磷酸化蛋白激酶AKT1抗體 胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒
TS ELISA Kit 磷酸化蛋白激酶B抗體 胸苷酸合成酶(TS)ELISA試劑盒
DH5α 感受態(tài)細胞100ul*100品牌SHBG ELISA Kit 磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體 性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒
SRY ELISA Kit 磷酸化內(nèi)收蛋白a1抗體 性別決定區(qū)Y蛋白(SRY)ELISA試劑盒
SRP ELISA Kit 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體 信號識別顆??贵w(SRP)ELISA試劑盒
STAT6 ELISA Kit 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體 信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子6(STAT6)ELISA試劑盒
技術(shù)傳授:
DH5α 感受態(tài)細胞100ul*100品牌凍存培養(yǎng)基
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C?;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。