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大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 TRFR Elisa KitRat transferrin receptor/TRFR ELISA Kit
大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 TRFRElisa Kit說明書TRFR，轉(zhuǎn)鐵蛋白受體（transferrin receptor）。轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TfR)是一種細胞膜受體，也是一種跨膜糖蛋白。主要在調(diào)節(jié)細胞鐵的攝取中發(fā)揮關鍵作用。正常人80%以上的TfR存在于骨髓紅系細胞上，紅系各階段細胞所表達的TfR數(shù)隨紅細胞的成熟而減少。原紅細胞上可有800,000個TfR，到網(wǎng)織紅細胞逐漸減少。原紅細胞上可有100,000個，成熟紅細胞上則無TfR。sTfR的數(shù)目可反映體內(nèi)鐵的利用狀況，在鐵代謝正常時亦可反映骨髓紅系的增情況，故在缺鐵性貧血、溶血性貧血時sTfR是增高的，而在再生障礙性貧血及慢性病貧血，sTfR是減少的。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)生物素（biotin）標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應；經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。

試劑配制:
1、大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 TRFRElisa Kit說明書酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
注意事項：
1加樣：
①大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 TRFRElisa Kit說明書實驗樣本過多時，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗時，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準確性，此外，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”，因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板：
①手工洗板時，拍板時要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復合物脫離；
②洗板機洗板時應經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次，或適當增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時，反應板應水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果，酶標儀不應置于陽光或強光照射下，需先預熱15-30 min再進行測試。
?現(xiàn)貨供應　二羰基/L-木酮糖還原酶(DCXR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應　二磷酸甘油酸變位酶(BPGM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應　二磷酸腺苷(ADP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應　丁酰膽堿酯酶(BCHE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應　丁酰膽堿酯酶(BCHE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應　十四烷基化丙氨酸豐富蛋白激酶C底物(MARCKS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應　連接蛋白2(JPH2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應　連接蛋白3(JPH3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應　連接蛋白4(JPH4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應　連續(xù)蛋白(TELE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應　圍脂滴蛋白1(PLIN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應　圍脂滴蛋白3(PLIN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應　Toll樣受體4(TLR4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應　肌球蛋白重鏈1(MYH1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應　肌球蛋白重鏈1(MYH1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應　肌球蛋白重鏈2(MYH2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應　腫瘤壞死因子受體超家族成員8(TNFRSF8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應　蛋白激酶Cθ(PKCθ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　規(guī)格：　48T/96T
大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 TRFRElisa Kit說明書SYBR Green I(PCR級，10000X)50ul支

革蘭氏陽性菌質(zhì)粒小量提取試劑盒100T盒

羊抗人IgM-HRP0.1ml支

考馬斯亮藍快速染色液500ml瓶

大鼠臟器組織淋巴細胞分離液試劑盒200ml/KIT盒

(-)-Gallocatechin gallate-GCG 沒食子兒茶素沒食子酸酯4233-96-920mg

Proanthocyanidins 原花青素4852-22-620mg

Hydroxysafflor yellow A 羥基紅花黃色素A78281-02-420mg

Cryptochlorogenic acid 隱綠原酸905-99-720mg

Xylopentaose 木五糖49694-20-410mg

Disodium 5'-Inosinate 5'-肌苷酸二鈉4691-65-020mg

L-Methionine L-蛋氨酸-硫氨酸63-68-3200mg

尼龍膜(0.45um)30cm×3m卷

p-NPP 對硝基磷酸二鈉鹽5g瓶

Polyethylene-polypropylene glycol 407 泊洛沙姆407100g瓶

Gelatin Sepharose 4FF 明膠-瓊脂糖凝膠 4FF25mL瓶

PNPG 對硝基基-β-D-吡喃葡萄糖苷1g瓶

Rhodamine B 羅丹明 B25g瓶
操作步驟：
1）大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 TRFRElisa Kit說明書運用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫，防止加樣時參加很多的氣泡，發(fā)生加樣上的差錯。
2）依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定，能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3）參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動混勻，37℃溫育1小時。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8）取出酶標板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應當即測定成果。
9）在450nm波利益測定各孔的OD值。