豇豆慢生根瘤菌圖片低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。
基本信息:
資源名稱(chēng) 豇豆慢生根瘤菌圖片
種屬:Bradyrhizobiumvigna
安全等級(jí) 1
模式菌株 no
應(yīng)用領(lǐng)域 與柱花草共生固氮
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基 9
生長(zhǎng)條件 28-30
脫水存法:
①豇豆慢生根瘤菌圖片沙土保存法,能產(chǎn)孢子的細(xì)菌、放線菌及霉菌可采用此法保存,即將沙和土以3:2比例混合,經(jīng)稀酸處理洗凈過(guò)篩,裝入小試管內(nèi),裝置高度為1cm;滅菌2~3次,烘干后即可將在斜面培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好的孢子,用無(wú)菌蒸餾水2~2.5ml制成孢子懸液,吸取少許加入沙土管中,經(jīng)真空抽干,外觀呈松散狀態(tài),于4℃冰箱保存,保存期可達(dá)5~7年。
② 冷凍干燥法,將孢子懸浮液與保護(hù)劑(一般用脫脂牛奶或血清)相混合,放在安瓿管內(nèi)于-20~-30℃的乙醇浴中速凍。然后,在低溫下用真空泵抽干,并用五氧化二磷或干冰使水汽結(jié)凍,熔封安瓿管,于低溫下保存。保存期可達(dá)5~10年之久。
③ 石蠟油封存法,在斜面菌種培養(yǎng)物上,倒上滅菌后的石蠟油,高出斜面1cm,于4℃冰箱或低溫干燥處保存,此法不適用于能利用石蠟油作碳源的微生物,保存期為一年以上。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈豇豆慢生根瘤菌圖片孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
注意事項(xiàng):
1、豇豆慢生根瘤菌圖片忌與殺菌的化學(xué)農(nóng)藥一并使用,使用過(guò)的殺菌劑或者噴霧器需要*清洗后才能使用。
2、包裝開(kāi)啟后請(qǐng)一次性用完,未用完應(yīng)密封,并放置于陰涼、干燥的環(huán)境里保存。
3、貯存方法:在密封、陰涼、干燥之處保存
藍(lán)PA3192 ug
apo- 轉(zhuǎn)鐵蛋白pAAV-helper2 ug
L- 轉(zhuǎn)鐵蛋白pAAV-hrGFP2 ug
反玉米素pAAV-hrRC2 ug
D- 海藻糖pAAV-IRES-hrGFP2 ug
三酸pAAV-LacZ2 ug
N- 三 ( 羥基 ) 基甘氨酸pAAV-MCS2 ug
2,3,5 化三基四唑pAAV-RC2 ug
三 ( 羥基 ) 氨基烷pAc5.1/V5-His A2 ug
三 ( 羥基 ) 氨基烷鹽酸鹽pAc5.1/V5-His B2 ug
曲拉通 X-100pAc5.1/V5-His C2 ug
曲拉通 X-114pAc5.1/V5-His/LacZ2 ug
臺(tái)盼藍(lán)pAc5.1B-EGFP2 ug
胰蛋白酶 1:250pAcAd5 9.2-100 2 ug
胰蛋白酶抑制劑pAcAd5 CMV-GFP 2 ug
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)緩沖MUG瓊脂用于濾膜MUG法檢測(cè)食品中大腸桿菌數(shù)(SN/T1059.2)Buffered MUG Agar100
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂用于濾膜MUG法檢測(cè)食品中大腸菌群數(shù)(SN/T1059.2)LMG Agar250
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)茜素-β-半乳糖苷瓊脂用于食品、飲料和飲用水中大腸菌群快速檢測(cè)和計(jì)數(shù)(GB/T)Aliz-gal Agar250
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Tergitol-7 瓊脂用于大腸菌群的鑒定(NMKL)Tergitol-7 Agar250
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)TTC 溶液(0.125%)添加于HB0127中TTC Solution(0.125%)2ml*10
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)I號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌計(jì)數(shù)、含糖(MERCK方法)Standard I Nutrient Agar250
豇豆慢生根瘤菌圖片MH肉湯(MHB) 250(g)
Antibiotic agar 1 GROVE and RANDALL medium 1 抗生素瓊脂11號(hào) 1.05269.0500MERCK默克
Reinforced clostridial medium(RCM)梭狀芽孢桿菌加強(qiáng)培養(yǎng)基 1.05411.0500MERCK默克
KLIGLER agar Double sugar iron agar acc.toKLIGLER KLIGLER 1.03913.0500MERCK默克
Nutrient agar營(yíng)養(yǎng)瓊脂 1.05450.0500MERCK默克
Standard count agar標(biāo)準(zhǔn)計(jì)數(shù)瓊脂 1.01621.0500MERCK默克
PALCAM培養(yǎng)基基礎(chǔ) 與PALCAM抗生素添加劑聯(lián)用,分離培養(yǎng)食品中的李斯特菌500g