基本信息:
資源名稱 腸膜明串珠菌說明書
種屬:Leuconostocmesenteroides
安全等級 1
模式菌株 no
應(yīng)用領(lǐng)域 產(chǎn)生右旋糖酐,做臨床輸液用
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基 131
生長條件 37℃
低溫存法:
①腸膜明串珠菌說明書簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
注意事項:
1、腸膜明串珠菌說明書忌與殺菌的化學(xué)農(nóng)藥一并使用,使用過的殺菌劑或者噴霧器需要*清洗后才能使用。
2、包裝開啟后請一次性用完,未用完應(yīng)密封,并放置于陰涼、干燥的環(huán)境里保存。
3、貯存方法:在密封、陰涼、干燥之處保存
脫水存法:
①腸膜明串珠菌說明書沙土保存法,能產(chǎn)孢子的細菌、放線菌及霉菌可采用此法保存,即將沙和土以3:2比例混合,經(jīng)稀酸處理洗凈過篩,裝入小試管內(nèi),裝置高度為1cm;滅菌2~3次,烘干后即可將在斜面培養(yǎng)基上生長良好的孢子,用無菌蒸餾水2~2.5ml制成孢子懸液,吸取少許加入沙土管中,經(jīng)真空抽干,外觀呈松散狀態(tài),于4℃冰箱保存,保存期可達5~7年。
② 冷凍干燥法,將孢子懸浮液與保護劑(一般用脫脂牛奶或血清)相混合,放在安瓿管內(nèi)于-20~-30℃的乙醇浴中速凍。然后,在低溫下用真空泵抽干,并用五氧化二磷或干冰使水汽結(jié)凍,熔封安瓿管,于低溫下保存。保存期可達5~10年之久。
③ 石蠟油封存法,在斜面菌種培養(yǎng)物上,倒上滅菌后的石蠟油,高出斜面1cm,于4℃冰箱或低溫干燥處保存,此法不適用于能利用石蠟油作碳源的微生物,保存期為一年以上。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈腸膜明串珠菌說明書孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
NCI-H522細胞株P(guān)EDV Fluorescent RT-PCR Kit2 ug
NCI-H596細胞株pEE122 ug
NCI-H661細胞株pEF1/myc-His A2 ug
NCI-H838細胞株pEF1/myc-His B2 ug
NCI-N87 [N87]細胞株pEF1/myc-His C2 ug
NCTC 1469 [NCTC1469]細胞株pEF1/myc-His lacZ2 ug
NEC細胞株pEF1a-hyPBase2 ug
Neuro-2a [N2a;Neuro 2a]細胞株pEF4/V5-His A2 ug
NFS-60細胞株pEF6/myc-His C2 ug
NG108-12 [108CC15]細胞株pEFFP-C22 ug
NIH 3T3細胞株P(guān)EG2 ug
NIH:OVCAR-3細胞株P(guān)EG 33502 ug
NR8383細胞株P(guān)EG 3350 Solution,50 2 ug
NRK-52E細胞株P(guān)EG 40002 ug
NRK細胞株P(guān)EG12000 2 ug
進口、國產(chǎn)TBB 培養(yǎng)基用于乳酪產(chǎn)品中梭菌的計數(shù)(Merck方法)Tyrobutyricum Broth Base250
進口、國產(chǎn)CHO培養(yǎng)基基礎(chǔ)用于厭氧菌的糖生化反應(yīng)(Acumedia 方法)CHO Medium Base250
進口、國產(chǎn)SCHAEDLER 瓊脂用于厭氧菌的分離培養(yǎng)(Acumedia 方法)SCHAEDLER AGAR250
進口、國產(chǎn)WILKINS-CHALGREN瓊脂用于厭氧菌的分離培養(yǎng)(Acumedia 方法)WILKINS-CHALGREN AGAR250
進口、國產(chǎn)MCP瓊脂用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的計數(shù)和培養(yǎng)(Acumedia 方法)MCP Agar250
進口、國產(chǎn)厭氧菌瓊脂用于厭氧菌分離培養(yǎng)Anaerobic Agar250
腸膜明串珠菌說明書去氧膽酸鹽瓊脂(DC) 1000(g)
多價蛋白胨酵母膏(PY)培養(yǎng)基 250(g)
酵母粉瓊脂 250(g)
Pfizer 腸球菌選擇性瓊脂 250(g)
BPL瓊脂 250(g)
RS瓊脂 250(g)
抗生素檢定培養(yǎng)基2號(pH 6.5-6.6) 250(g)