試劑配制:
1、豬磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶Elisa Kit品牌酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
產品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
豬磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶Elisa Kit品牌 | Porcine AMPK ELISA Kit | 48T/96T |
豬磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)Elisa KitPorcine AMPK ELISA Kit
豬磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶Elisa Kit品牌【實驗用途】AMPK,磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶,腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)是一種重要的代謝應激蛋白激酶,在運動、缺氧等應激條件下 一旦活化就可以使許多參與葡萄糖攝取和脂肪酸氧化的蛋白磷酸化,促進葡萄糖攝取。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經生物素(biotin)標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。
操作步驟:
1)豬磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶Elisa Kit品牌運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應當即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
注意事項:
1加樣:
①豬磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶Elisa Kit品牌實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應經常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結果要在15-30 min內完成,定性測定用肉眼判讀試驗結果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
公司豬磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶Elisa Kit品牌采用的全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產品齊全,質量可靠。點擊了解更多其它elisa kit。?現(xiàn)貨供應 復合素3(CPLX3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應 復合素4(CPLX4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應 復制啟動因子1(REPIN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應 復制啟動因子1(REPIN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應 復制蛋白A1(RPA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應 復制蛋白A1(RPA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應 端粒酶關聯(lián)蛋白1(TEP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應 端粒酶關聯(lián)蛋白1(TEP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應 端粒酶關聯(lián)蛋白1(TEP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應 端粒酶逆轉錄酶(TERT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應 端錨聚合酶1(TNKS1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應 端錨聚合酶2(TNKS2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應 無翅型MMTV整合位點家族成員11(WNT11)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應 Notch2氨基端樣蛋白(NOTCH2NL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應 伴刀豆球蛋白A(ConA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應 凝血酶原片段F1+2(F1+2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應 上腺素能受體α2C(ADRα2C)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應 低密度脂蛋白受體相關蛋白4(LRP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
豬磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶Elisa Kit品牌* 開環(huán)異落葉松樹脂酚 規(guī)格:
* 開環(huán)異落葉松樹脂酚二葡萄糖苷 規(guī)格:
* 柯里拉京 規(guī)格:
* 柯諾辛 規(guī)格:
* 苦參堿 規(guī)格:
* 苦蒿素 規(guī)格:
* 苦杏仁苷 規(guī)格:
* 奎寧 規(guī)格:
* 辣椒堿 規(guī)格:
* 老鸛草素 規(guī)格: