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| 產(chǎn)品名稱 | DH5α 感受態(tài)細(xì)胞100ul*20 |
| 包裝 | 100ul*20 |
| 分類 | 克隆感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。
磷酸化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體 fPSA ELISA Kit 游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒
磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體 FT4 ELISA Kit 游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 F-TESTO ELISA Kit 游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 FP-S ELISA Kit 游離蛋白S(FP-S)ELISA試劑盒
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 FE3 ELISA Kit 游離雌三醇(FE3)ELISA試劑盒
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 f-βhCG ELISA Kit 游離β絨毛膜*(f-βhCG)ELISA試劑盒
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 Hp-IgG ELISA Kit 幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 Hp-IgM ELISA Kit 幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA試劑盒
活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體 HP-CagA-IgG ELISA Kit 幽門螺桿菌細(xì)胞毒素相關(guān)基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)ELISA試劑盒
活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體 EL ELISA Kit 優(yōu)球蛋白(EL)ELISA試劑盒
AICAR甲?；D(zhuǎn)移酶抗體 SOST ELISA Kit 硬骨素(SOST)ELISA試劑盒
磷酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體 IHH ELISA Kit 印度刺猬因子(IHH)ELISA試劑盒
ATP5E蛋白抗體 NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1 ELISA Kit 隱熱蛋白(NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1)ELISA試劑盒
RRM2B MHCⅡ/HLA-Ⅱ ELISA Kit ABI基因家族成員3結(jié)合蛋白抗體 人 RRM2B / P53R2 ELISA配對(duì)抗體 主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA試劑盒
IL1R1 MHCⅠ/HLAⅠ ELISA Kit Rho GTP酶激活蛋白20抗體 大鼠 IL-1R1 / CD121a ELISA配對(duì)抗體 主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA試劑盒
CD86 MVP ELISA Kit 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族10抗體 大鼠 CD86 / B7-2 ELISA配對(duì)抗體 主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒
CD209B Ntn4 ELISA Kit 乙醛脫氫酶1蛋白家族L1抗體 小鼠 SIGNR1 / CD209b ELISA配對(duì)抗體 軸突生長誘向因子4(Ntn4)ELISA試劑盒
IL1B Ntn1 ELISA Kit 軸抑制蛋白2抗體 人 IL-1 beta / IL1B / IL-1F2 ELISA配對(duì)抗體 軸突生長誘向因子1(Ntn1)ELISA試劑盒
F9 CDK-7 ELISA Kit 血管生成素相關(guān)蛋白6抗體 人 Coagulation Factor IX / FIX / F9 ELISA配對(duì)抗體 周期素依賴性激酶7(CDK-7)ELISA試劑盒
FCGR2A CDK5 ELISA Kit Muellerian繆勒管激素抑制因子抗體 食蟹猴 CD32a / Fc gamma RIIA / FCGR2A ELISA配對(duì)抗體 周期素依賴性激酶5(CDK5)ELISA試劑盒
CD44 CDK-4 ELISA Kit *蛋白激酶受體A8抗體 人 CD44 ELISA配對(duì)抗體 周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA試劑盒
CR2 CDK-2 ELISA Kit 脂肪酰*家族成員1抗體 人 CD21 ELISA配對(duì)抗體 周期素依賴性激酶2(CDK-2)ELISA試劑盒
CD19 CDK-1 ELISA Kit 芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣2抗體 人 CD19 ELISA配對(duì)抗體 周期素依賴性激酶1(CDK-1)ELISA試劑盒
AFP RAG-2 ELISA Kit 磷酸化芳香胺N-乙酰化轉(zhuǎn)移酶抗體 人 AFP / alpha-fetoprotein ELISA配對(duì)抗體 重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒
REG4 RAG-1 ELISA Kit 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白1抗體 人 REG4 ELISA配對(duì)抗體 重組激活基因1(RAG-1)ELISA試劑盒
ENG NE-B ELISA Kit 粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 小鼠 Endoglin / CD105 / ENG ELISA配對(duì)抗體 重酒石酸*(NE-B)ELISA試劑盒
FAS TAF ELISA Kit 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白DOC6抗體 人 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 ELISA配對(duì)抗體 腫瘤血管生長因子(TAF)ELISA試劑盒
ICAM1 TAA ELISA Kit AFG3樣蛋白2/脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白28抗體 大鼠 ICAM-1 / CD54 ELISA配對(duì)抗體 腫瘤相關(guān)抗原(TAA)ELISA試劑盒
DH5α 感受態(tài)細(xì)胞100ul*20PLXDC1 TSTA ELISA Kit 激活素受體相互作用蛋白1抗體 人 TEM7 / PLXDC1 ELISA配對(duì)抗體 腫瘤特異性移植抗原(TSTA)ELISA試劑盒
SEMA4D TSGF ELISA Kit 醛固酮類還原酶家族7成員A2抗體 小鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 ELISA配對(duì)抗體 腫瘤特異性生長因子(TSGF)ELISA試劑盒
注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過長，長時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。
