B.cereus的生物學(xué)特性與微生物學(xué)檢驗(yàn)！

B.cereus的生物學(xué)特性與微生物學(xué)檢驗(yàn)！

（B.cereus)屬于芽胞桿菌屬，在營養(yǎng)瓊脂上能形成芽胞，因其菌落表面粗糙似白蠟狀，故得名。

一、生物學(xué)特性

⒈形態(tài)結(jié)構(gòu)*為革蘭陽性、兩端較鈍圓的大桿菌，大小為(1.0～1.2)um×(3.0～5.0) um，多呈鏈狀排列。生長6h后即可形成芽胞，芽胞呈卵圓形，位于菌體中心，不大于菌體。引起食物中毒的菌株多為周毛菌，不形成莢膜。

⒉培養(yǎng)特性為需氧或兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高，在普通營養(yǎng)瓊脂平板上生長良好，形成較大、灰白色、不透明、表面粗糙似毛玻璃狀或融蠟狀菌落，在*上可出現(xiàn)β溶血。在肉湯培養(yǎng)基中呈均勻混濁生長，液面有菌膜形成。

⒊生化反應(yīng)能分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、水楊昔、果糖，不分解木糖、鼠李糖、*，能液化明膠，緩慢液化牛乳，VP試驗(yàn)陽性，多數(shù)菌株能利用枸櫞酸鹽。觸酶陽性，DNA酶陽性，*酶陽性。在卵黃瓊脂平板上生長迅速，培養(yǎng)3h后雖未見菌落，但能看到由于*酶分解*而形成的白色混濁環(huán)，稱為乳光反應(yīng)或卵黃反應(yīng)。

二、臨床意義

B.cereus廣泛分布于水、土壤及塵埃中，可在淀粉制品、乳及乳制品、肉、魚、蔬菜、醬油、布丁、炒米飯、各種甜點(diǎn)等食品中大量生長繁殖，引起人類食物中毒。此菌在米飯中極易生長繁殖，我國由此引起的食物中毒報道較多。

本菌引起的食物中毒以夏、秋季多見，*主要的致病物質(zhì)是腸毒素，引起的食物中毒有兩種類型：一類為腹瀉型，由不耐熱腸毒素（LT）引起，進(jìn)食后6～15 h發(fā)病，臨床表現(xiàn)為腹痛、腹瀉和里急后重，偶有嘔吐或發(fā)熱，通常在24 h恢復(fù)正常；另一類為嘔吐型，由耐熱腸毒素（ST）引起，于進(jìn)餐后1～6h發(fā)病，患者主要臨床表現(xiàn)為嘔吐，僅部分有腹瀉，病程一般不超過24h。外傷后*引起的全眼球炎是一種進(jìn)展非常迅速的嚴(yán)重病癥，治療不及時易造成失明。*還可引起敗血癥、腦膜炎和心內(nèi)膜炎等。

三、微生物學(xué)檢驗(yàn)

（一）檢驗(yàn)程序

B.cereus檢驗(yàn)程序見圖22-2。

圖22-2*檢驗(yàn)程序

（二）標(biāo)本采集

采集可疑食物、患者糞便、嘔吐物、血液等進(jìn)行檢驗(yàn)。暴露于空氣中的食品在一定程度上都可受到本菌污染，除進(jìn)行*的分離培養(yǎng)外，必須作活菌計數(shù)，每克或每毫升食物中細(xì)菌數(shù)大于lO5 CFU方有診斷價值。

（三）標(biāo)本直接檢查

采集的標(biāo)本用無菌生理鹽水制成細(xì)菌懸液，直接涂片、革蘭染色鏡檢，可見革蘭陽性大桿菌、兩端鈍圓、呈鏈狀排列，無莢膜。

（四）活菌計數(shù)

將可疑食物樣本用生理鹽水稀釋成10-3～10-1g/mL。

⒈涂布法取各稀釋液0.1 mL一分別均勻涂布接種于卵黃瓊脂平板上，置35℃孵育12h，*能產(chǎn)生乳光反應(yīng)，易于識別。

⒉傾注平板法取各稀釋液0.1 mL分別注入無菌的空平皿內(nèi)，再將融化冷至45℃左右的適量的營養(yǎng)瓊脂傾入該平皿中并立即混勻，凝固后置35℃培養(yǎng)，24～48 h后觀察結(jié)果，計算出每毫升樣本中所含活菌數(shù)。每個稀釋度做兩個平皿。

（五）分離培養(yǎng)

將可疑食物置無菌研缽中，加適量生理鹽水研磨，分別接種于營養(yǎng)瓊脂平板和*上。若為嘔吐物，則可直接分離接種，于35℃培養(yǎng)18～24 h后，觀察細(xì)菌生長情況，如發(fā)現(xiàn)似蠟樣菌落可進(jìn)一步分離純培養(yǎng)，然后進(jìn)行生化鑒定和藥敏試驗(yàn)。

（六）鑒定

B.cereus的主要特征：革蘭陽性大桿菌，芽胞位于菌體*，不大于菌體，常呈鏈狀排列。菌落呈毛玻璃樣或融蠟狀。能分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、果糖、水楊苷，能液化明膠，緩慢液化牛乳，VP試驗(yàn)陽性，*酶陽性。確定為*后可繼續(xù)進(jìn)行血清學(xué)分型、噬菌體分型及腸毒素檢測。

臨床常見革蘭陽性需氧芽胞桿菌的主要特征見表22-1。動力陽性可排除炭疽芽胞桿菌和蕈狀芽胞桿菌；溶血、不分解*，可排除巨大芽胞桿菌；*試驗(yàn)陰性和*酶試驗(yàn)陽性，可排除蘇云金芽胞桿菌；*酶陽性排除枯草芽胞桿菌和巨大芽胞桿菌。

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