志賀氏菌的血清學鑒定方法！

志賀氏菌的血清學鑒定方法！

⒈抗原的準備

志賀氏菌屬沒有動力，所以沒有鞭毛抗原。志賀氏菌屬主要有菌體（O）抗原。菌體O 抗原又可分為型和群的特異性抗原。

一般采用1.2﹪～1.5%瓊脂培養(yǎng)物作為玻片凝集試驗用的抗原。

備注1： 一些志賀氏菌如果因為K 抗原的存在而不出現凝集反應時，可挑取菌苔于1 mL 生理鹽水做成濃菌液，100℃煮沸15 min～60 min 去除K 抗原后再檢查。

備注2：D 群志賀氏菌既可能是光滑型菌株也可能是粗糙型菌株，與其他志賀氏菌群抗原不存在交叉反應。與腸桿菌科不同，宋內氏志賀氏菌粗糙型菌株不一定會自凝。宋內氏志賀氏菌沒有K 抗原。

⒉凝集反應

在玻片上劃出2 個約1cm×2cm 的區(qū)域，挑取一環(huán)待測菌，各放1/2 環(huán)于玻片上的每一區(qū)域上部，在其中一個區(qū)域下部加1 滴抗血清，在另一區(qū)域下部加入1 滴生理鹽水，作為對照。再用無菌的接種環(huán)或針分別將兩個區(qū)域內的菌落研成乳狀液。將玻片傾斜搖動混合1 min，并對著黑色背景進行觀察，如果抗血清中出現凝結成塊的顆粒，而且生理鹽水中沒有發(fā)生自凝現象，那么凝集反應為陽性。

如果生理鹽水中出現凝集，視作為自凝。這時，應挑取同一培養(yǎng)基上的其他菌落繼續(xù)進行試驗。

如果待測菌的生化特征符合志賀氏菌屬生化特征，而其血清學試驗為陰性的話，則按5.5.1 備注1 進行試驗。

⒊血清學分型（選做項目）

先用四種志賀氏菌多價血清檢查，如果呈現凝集，則再用相應各群多價血清分別試驗。先用B 群福氏志賀氏菌多價血清進行實驗，如呈現凝集，再用其群和型因子血清分別檢查。如果B 群多價血清不凝集，則用D 群宋內氏志賀氏菌血清進行實驗，如呈現凝集，則用其Ⅰ相和Ⅱ相血清檢查；如果B、D 群多價血清都不凝集，則用A 群痢疾志賀氏菌多價血清及1～12 各型因子血清檢查，如果上述三種多價血清都不凝集，可用C 群鮑氏志賀氏菌多價檢查，并進一步用1～18 各型因子血清檢查。

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