微生物在常見(jiàn)選擇性培養(yǎng)基上的菌落特征！
微生物在常見(jiàn)選擇性培養(yǎng)基上的菌落特征！
微生物培養(yǎng)，在選擇性分離培養(yǎng)基、顯色培養(yǎng)基上的菌落特征，皆由微生物生長(zhǎng)繁殖及代謝產(chǎn)物決定，培養(yǎng)基所含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，皆為了滿足微生物生長(zhǎng)和代謝所需。
一、培養(yǎng)基簡(jiǎn)介：
培養(yǎng)基是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。有的培養(yǎng)基還含有抗菌素和色素，用于各種微生物培養(yǎng)和鑒定。
一般基礎(chǔ)培養(yǎng)基中含有蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸膏、瓊脂等基本營(yíng)養(yǎng)萬(wàn)分。
一些選擇、鑒定培養(yǎng)基根據(jù)用途不同，則需加入抑菌劑、指示劑、血液、糖等試劑，以利于需要菌的生長(zhǎng)與鑒別。
一些需要使細(xì)菌大量生長(zhǎng)、繁殖的培養(yǎng)基，主要成分多為氨基酸、核苷酸、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子等。
瓊脂：是由石花菜或江籬(屬紅藻)中提取的一種藻膠，是由瓊脂糖和瓊膠質(zhì)組成的長(zhǎng)鏈多糖化合物。優(yōu)點(diǎn)在于不能被細(xì)菌分解利用，在細(xì)菌培養(yǎng)的溫度下凝膠強(qiáng)度穩(wěn)定。
蛋白胨：為動(dòng)物蛋白經(jīng)酶消化后產(chǎn)物，能為微生物提供C源、N源、生長(zhǎng)因子等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
胰酪蛋白胨：是一種優(yōu)質(zhì)蛋白胨，亦稱*消化酪蛋白胨或胰蛋白胨。系采用酪蛋白經(jīng)*消化后，濃縮干燥而成。可配制各種微生物培養(yǎng)基，用于細(xì)菌的培養(yǎng)、分離、增殖、鑒定，以及無(wú)菌試驗(yàn)培養(yǎng)基、厭氧菌培養(yǎng)基等細(xì)菌生化特性試驗(yàn)用培養(yǎng)基的配置。
牛肉浸膏：是新鮮牛肉經(jīng)剔除脂肪，消化過(guò)濾濃縮得到的一種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，含有肌酸、肌酸酐、多肽類、氨基酸、核苷酸、有機(jī)酸、礦物質(zhì)及維生素的水溶性物質(zhì)。主要作用是為了補(bǔ)充蛋白胨以及其他氮源的營(yíng)養(yǎng)不足。
酵母粉：富含B族維生素、有機(jī)氮以及碳水化合物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
膽鹽：是膽酸鈉鹽，是從動(dòng)物的膽汁中提取的一種混合物，含膽酸、結(jié)合膽酸以及膽汁醇等，膽鹽用在培養(yǎng)基中是作為選擇性抑制劑，主要抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng)。
二、培養(yǎng)基分類：
按營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可分為：
1、天然培養(yǎng)基：指一類利用動(dòng)、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。如蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基等。
2、組合培養(yǎng)基：又稱為合成培養(yǎng)基或綜合培養(yǎng)基，是一類按微生物的營(yíng)養(yǎng)要求精確設(shè)計(jì)后用多種高純化學(xué)試劑配制成的培養(yǎng)基。如葡萄糖銨鹽培養(yǎng)基、淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基等。
3、半組合培養(yǎng)基：一類主要以化學(xué)試劑配制，同時(shí)還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如，馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。
按物理性狀分：
1、液體培養(yǎng)基：一類呈液態(tài)的培養(yǎng)基。
2、固體培養(yǎng)基：一類外觀呈固態(tài)的培養(yǎng)基。根據(jù)性質(zhì)又分為。固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。
3、半固體培養(yǎng)基：指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。
4、脫水培養(yǎng)基：又稱預(yù)制干燥培養(yǎng)基，指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。
按功能性分為：
1、選擇性培養(yǎng)基：一類根據(jù)某微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基，具有使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌的功能，廣泛用于菌種篩選等領(lǐng)域。
2、鑒別培養(yǎng)基：一類在成分中加有能與目的菌的無(wú)色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑，從而達(dá)到只須用肉眼辨別顏色就能方便的從近似菌落中找出目的菌菌落的培養(yǎng)基。例如，伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基（EMB）。
3、運(yùn)輸培養(yǎng)基
4、保存培養(yǎng)基
5、復(fù)蘇培養(yǎng)基
6、*
7、鑒定培養(yǎng)基
8、多用途培養(yǎng)基
三、培養(yǎng)基常用指示劑及變色范圍：
四、幾種ISO、GB、SN常見(jiàn)選擇性培養(yǎng)基及顯色培養(yǎng)基的培養(yǎng)基配方及菌落特征分析：
大腸桿菌在結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA）上的菌落特征
結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA）
成分(g/L)：
蛋白胨 7.0
酵母粉 3.0
乳糖 10.0
膽鹽 1.5
結(jié)晶紫 0.002
中性紅 0.03
瓊脂 15.0
pH值7.4 ± 0.1 25℃
用法：
稱取本品 41.5g,加熱溶解于1000ml 蒸餾水中,煮沸不要超過(guò)2 分鐘。取適宜稀釋度樣品液 1ml,加入到無(wú)菌平皿中心,將冷至 45 ± 0.5℃ 的 VRBA 10-15ml傾注于平皿中。小心旋轉(zhuǎn)平皿將培養(yǎng)基與樣液充分混勻。凝固后，再加 3-4ml VRBA 覆蓋平板表層 ,翻轉(zhuǎn)平板 ,置于36 ± 1℃培養(yǎng) 18-24 小時(shí)。無(wú)需高壓滅菌。臨用時(shí)制備,不得超過(guò)3 小時(shí)。
檢驗(yàn)原理：
蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源、維生素、生長(zhǎng)因子和輔酶等其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；維持均衡的滲透；乳糖為可發(fā)酵碳水化合物，可作為一種能量來(lái)源；3 號(hào)膽鹽和結(jié)晶紫可抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng)；中性紅為指示劑；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
微生物靈敏度：
接種以下質(zhì)控菌株，放置36±1℃需氧培養(yǎng)18-24 小時(shí)。
典型特征：
大腸埃希氏菌在結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA）上呈紫紅色菌落，可有沉淀環(huán)。
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