放線菌的形態(tài)觀察與操作步驟及注意事項！
放線菌的形態(tài)觀察與操作步驟及注意事項！
放線菌是由不同長短的纖細的菌絲所形成的單細胞菌絲體。菌絲體分為兩部分，即潛入培養(yǎng)基中的營養(yǎng)菌絲（或稱基內菌絲）和生長在培養(yǎng)基表面的氣生菌絲。有些氣生菌絲分化成各種孢子絲，呈螺旋形、波浪形或分枝狀等。孢子常呈圓形、橢圓形或桿形。氣生菌絲及孢子的形狀和顏色常作為分類的重要依據。
想要了解放線菌的形態(tài)首先要準備實驗材料和用具：細黃鏈霉菌(streptomycs micuoflavus)又稱5406的培養(yǎng)平皿，棘孢小單孢菌(Micromonospora echinospora)的玻璃紙培養(yǎng)平皿。 0.1%美藍染色液、石炭酸復紅染色液； 蓋玻片、載玻片、鑷子、接種環(huán)、顯微鏡、涂布器、玻璃紙、打孔器。
操作步驟
(一)觀察自然生長狀態(tài)的放線菌
用鑷子小心取出用插片法培養(yǎng)的5406菌培養(yǎng)皿中的一張蓋玻片，將其背面附著的菌絲體擦凈。然后將長有菌的一面向上放在潔凈的載玻片上，用低倍鏡、高倍鏡觀察。找出3類菌絲及其分生孢子，并繪圖。注意放線菌的基內菌絲、氣生菌絲的粗細和色澤差異。
(二)水封片觀察
取一滴美藍染色液置于載玻片*，將用搭片法培養(yǎng)棘孢小單孢菌培養(yǎng)皿中的蓋玻片取出，并將有菌面朝下，放在載玻片上，浸在染色液中，制成水封片，用高倍鏡觀察其單個分生孢子及其基內菌絲，并繪圖。
(三)玻璃紙法的鏡檢觀察
1、直接玻璃紙觀察 分別用5406和棘孢小單孢菌的玻璃紙制片觀察。制片時，于載玻片上放一小滴蒸餾水，將含菌玻璃紙片小心剪下一小塊，移至載玻片上，并使有菌面向上。在玻璃紙與載玻片間不能有氣泡，以免影響觀察。將制片于顯微鏡下觀察，先用低倍鏡觀察菌的立體生長狀況，再用高倍鏡仔細觀察。注意區(qū)分5406菌的基內菌絲、氣生菌絲和彎曲狀或螺旋狀的孢子絲。觀察棘孢小單孢菌時注意把視野調暗，其基內菌絲纖細發(fā)亮，其單個分生孢子發(fā)暗，直接生長在基內菌絲長出的小梗上。繪圖。
2、印片染色法觀察 用鑷子取潔凈載玻片并微微加熱，然后用這微熱載玻片蓋在長有5406或棘孢小單孢菌的平皿上，輕輕壓一下，注意將載玻片垂直放下和取出，以防載玻片水平移動而破壞放線菌的自然形態(tài)。反轉有印痕的載玻片微微加熱固定．用石炭酸復紅染色l min，水洗，晾干。用油鏡觀察。繪圖。注意比較兩種菌的形態(tài)特征有何不同。
注意事項
1、培養(yǎng)放線菌中要注意，放線菌的生長速度較慢，培養(yǎng)期較長，在操作中應特別注意無菌操作，嚴防雜菌污染。
2、玻璃紙法培養(yǎng)接種時注意玻璃紙與平板瓊脂培養(yǎng)基間不宜有氣泡，以免影響其表面放線菌的生長，
3、不同觀察方法中嚴格按要求進行，注意菌體的上下位置。
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