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腸球菌屬的生物學(xué)性狀與主要檢測步驟!

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                  腸球菌屬的生物學(xué)性狀與主要檢測步驟!



腸球菌屬的生物學(xué)性狀與主要檢測步驟!


一、概況


細(xì)菌分類學(xué)上,腸球菌屬早期并不存在,現(xiàn)今的一些菌種本歸屬于鏈球菌屬,1989年,依據(jù)Facklam和Collins的分類,腸球菌屬內(nèi)包括十二個種及一個變異株,它們是:


糞腸球菌(E.faecalis) 屎腸球菌(E.faecium)


鳥腸球菌(E.avium) 酪黃腸球菌(E.casseliflavus)


堅忍腸球菌(E.durans) 雞腸球菌E.galinarum)


芒地腸球菌(E.mundii) 惡臭腸球菌(E.maladoratum)


希拉腸球菌(E.hirae) 孤立腸球菌(E.solitarius)


棉子糖腸球菌(E.raffinosus) 假鳥腸球菌(E.pseudoavium)


糞腸球變異株(E.faecalis var)。


糞腸球菌為該屬中見的即為代表種。該屬通常指糞便來的可以用氮鈉分離鑒定的一群革蘭氏陽性球菌。由于腸球菌的菌種均含有Lancefield的D群抗原,亦稱D群糞腸球菌或D群腸球菌。腸球菌的DNA G+C含量33%-39%mol。


腸球菌普遍存在于自然界,一般棲居在各種溫血和冷血動物的腔腸,甚至昆蟲體內(nèi),也是健康人體的上呼吸道,口腔或腸道的常居菌。本菌可以引起心內(nèi)膜炎,膽囊炎,腦膜炎,尿路感染及傷口感染等多種疾病。在人類糞便中的數(shù)量僅次于大腸菌群,每克成人的糞便中約含2×108個。由于此污染指示菌比較大腸桿菌對外界環(huán)境溫度適應(yīng)性強(qiáng)、抵抗力強(qiáng)及耐受性強(qiáng),甚至可以與多種抗生素相抵抗和生長營養(yǎng)要求不高,因此在自然界分布廣,存活力持久。在無糞便污染的環(huán)境中較大腸菌更易發(fā)現(xiàn),所以,即使檢出腸球菌也沒有糞便污染的指示作用。此外,即使在冷凍,干燥性和經(jīng)中等強(qiáng)度加熱處理的食品中檢出腸球菌也不能提示腸道致病菌的存在,因為腸球菌比沙門氏菌,致病性大腸桿菌抵抗性及存活率均高。


食品微生物檢驗主要針對在10℃和45℃下可生長發(fā)育的糞腸球菌與屎腸球菌,二者在生化特性、DNA雜交結(jié)果有明顯不同。在45℃條件下,用含疊氮鈉成分的培養(yǎng)基檢測此類指示菌是其主要特征。


目前該菌多作為生活飲用水,管道水和一些水質(zhì)的指示菌。衛(wèi)生學(xué)家認(rèn)為,腸球菌類似于大腸菌群的生態(tài)活動,但其對惡劣的外環(huán)境和冷凍條件具有較強(qiáng)的抵抗力,作為監(jiān)測水質(zhì)衛(wèi)生,環(huán)境衛(wèi)生質(zhì)量的污染指標(biāo)更具有衛(wèi)生學(xué)意義。另據(jù)有關(guān)報道,大量的(109以上)腸球菌可以引起食物中毒,作為一個有衛(wèi)生學(xué)意義的細(xì)菌(該菌的污染在某些食品中也常被發(fā)現(xiàn)),有些國家已經(jīng)制定了針對腸球菌污染*,大多制定在0/克~105/克范圍內(nèi)。從預(yù)防食物中毒方面,保障人民身體健康考慮,借鑒國外標(biāo)準(zhǔn),制定適宜的污染*,應(yīng)盡快擺到議事日程上來。


二、生物學(xué)性狀


1、形態(tài)與染色


腸球菌屬的細(xì)菌為革蘭氏陽性球菌,多數(shù)菌種成雙或呈短鏈狀排列;一般無芽胞,無莢膜,少數(shù)菌種有鞭毛,陳舊培養(yǎng)物或在厭氧狀態(tài)下有時呈革蘭氏陰性。


2、培養(yǎng)特性


在普通瓊脂及麥康凱瓊脂上形成小菌落,在血瓊脂上形成較鏈球菌稍大的菌落,光滑、較濕潤、易乳化,依據(jù)種的不同,α、β或γ溶血均可出現(xiàn)。在液體培養(yǎng)基中呈均勻渾濁生長,也較易形成長鏈。需氧或兼性厭氧,適生長溫度37℃,適pH為4.7-7.6,屬內(nèi)各菌種均能在6.5%肉湯,pH9.6葡萄糖肉湯及45℃生長,個別菌種在50℃時生長快。


3、抗原結(jié)構(gòu)


Lancefied血清系統(tǒng)屬D群,其特異性抗原決定簇是位于細(xì)胞壁中的甘油壁酸,本質(zhì)上是多糖類,含有N-乙酰己糖胺。


4、生化反應(yīng)


過氧化氫酶呈陰性,能分解葡萄糖、麥芽糖生成酸,多數(shù)菌株分解*;膽汁七葉苷水解、*敏感性及咯烷基芳基酰胺酶均為陽性;耐一定程度的酸堿、耐鹽和40%的膽鹽;結(jié)合D群抗血清進(jìn)行血清學(xué)鑒定可用來區(qū)分腸球菌與鏈球菌,乳球菌屬。依據(jù)*、*、山梨糖產(chǎn)酸及*脫氨基四個關(guān)鍵性的生化生理實驗,可將腸球菌分為三個群。


三、腸球菌屬主要檢測步驟如下:


檢樣

AC培養(yǎng)基

36℃ ↓ 48±3h

↓ ↓

(推斷試驗陰性) (推斷試驗陽性)

     ↓

    AC培養(yǎng)基

   45±0.5℃↓ 48±3h

   ↓   ↓

   (確定試驗陰性)  (確定試驗陽性)

      ↓

     葡萄糖瓊脂

  36±1℃ ↓48±3h

  單獨(dú)集落

  ↓

  葡萄糖肉湯

  ↓

  ↓   ↓

6.5%葡萄糖   葡萄糖瓊脂斜面

36±1℃↓48±3h   36±1℃↓24±2h

↓       ↓

    ↓     過氧化氫酶(-)

   ↓    革蘭氏陽性球菌

↓       ↓

-----------------

(*試驗陽性)

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