GB-T 18979-2003 食品中的測定 免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法標準規(guī)定了免疫親和層析凈化—高效液相色譜法和免疫親和層析凈化—熒光光度法測定食品中的條件和詳細分析步驟
本標準適用于玉米、花生及其制品(花生醬、花生仁、花生米)、大米、小麥、植物油脂、醬油、食醋等食品中的測定。
樣品中的檢出限:免疫親和層析凈化—高效液相色譜法和免疫親和層析凈化—熒光光度法為1mg/kg;免疫親和層析凈化—熒光光度法測定醬油樣品中檢出限為2.5mg/kg。
免疫親和層析凈化高效液相色譜法
方法提要
試樣經(jīng)過甲醇-水提取,提取液經(jīng)過濾、稀釋后,濾液經(jīng)過含有特異抗體的免疫親和層析凈化,此抗體對B1、B2、G1、G2具有專一性,交聯(lián)在層析介質(zhì)中的抗體上。用水或吐溫/PBS將免疫親和柱上雜質(zhì)除去,以甲醇通過免疫親和層析柱洗脫,洗脫液通過帶熒光檢測器的高效液相色譜儀柱后碘溶液衍生測定的含量。
儀器和設(shè)備
實驗室常規(guī)儀器、設(shè)備、材料及下列各項。
1 高速均質(zhì)器:18,000 r/min ~22,000 r/min。
2 免疫親和柱。
3 玻璃纖維濾紙:直徑11cm,孔徑1.5μm。
4 玻璃注射器:10 mL,20mL。
5 玻璃試管:直徑12 mm ,長75mm,無熒光特性。
6 高效液相色譜儀:具有360nm激發(fā)波長和大于420nm發(fā)射波長的熒光檢測器。
7 空氣壓力泵。
8 微量注射器:100mL。
9 色譜柱:C18柱(柱長150 mm ,內(nèi)徑4.6mm,填料直徑5mm)。
標準配置
熒光檢測器
四元低壓泵單元(帶自動在線柱后清洗、在線脫氣機)
寬溫程帶制冷柱溫箱
溶劑托盤
高效液相色譜儀HPLC-3000
技術(shù)參數(shù) :
P3000高壓:
輸液方式 :雙柱塞往復(fù)泵,一個主吸液柱塞。一個為輔助柱塞
泵頭分析型:10ml不銹鋼/PEEK泵頭/半制備型50ml不銹鋼/PEEK泵頭
工作壓力分析型:42MPa不銹鋼泵頭/30MPa PEEK泵頭 半制備型:30MPa不銹鋼泵頭/20MPa PEEK泵
流量范圍分析型:0.001-9.999ml 半制備型:0.01-49.99 ml
流量精度 :RSD ≤ 0.5%(1ml/min)
流量重復(fù)性 :RSD ≤ 0.1%(1ml/min)
顯示屏幕 :320*240點陣大屏幕液晶顯示,可調(diào)藍色背光。
系統(tǒng)保護 :慢速啟動,停止低于最小壓力2ML。最小壓力可調(diào),用戶數(shù)據(jù)自動儲存。
系統(tǒng)連接 :1/16”管線連接
控制系統(tǒng)
獨立模式 :全鍵盤設(shè)定參數(shù)。工作于高壓梯度模式時,其中一臺泵為主泵,控制其他相同型號的高壓,并通過顯示器上的梯度曲線對所顯示的梯度方式進行驗證。 串口模式 :通過RS232口,控制高壓。
注:外型尺寸:398*149*267mm 重量:10 kg 電源功率:220V ± 10%,50H Z , 40W
UV3000 檢測器
波長范圍/精度 :190 — 700nm ± 2nm
波長重復(fù)性 :0.4nm
燈源 :氘燈(標準配置);鎢燈(可替換)
燈源控制 :可進行燈選擇,燈開/關(guān)設(shè)定
掃描功能 :停留掃描,掃描可編程即掃描起點和結(jié)束點可設(shè)定,掃描步長可設(shè)定。
檢測范圍 :0 — 2AU
基線噪聲 :1.5*10—5AU/h 動態(tài):流速1ml/min 甲醇/水=80/20,波長254nm
基線漂移 :4*10-4AU/h 動態(tài):流速1ml/min 甲醇/水=80/20,波長254nm
時間常數(shù) :0.1/0.2/0.5/1/2/5/10S
模擬信號 :± 0.1V ± 1.0V ± 10V
積分輸出 :16級可調(diào)
自動調(diào)零 :滿量程
控制
獨立模式:全鍵盤設(shè)定參數(shù)。 串口模式:通過RS232口,控制高壓。
顯示屏幕 :320*240點陣大屏幕液晶顯示,可調(diào)藍色背光。
GLP :總的點燈時間,點燈次數(shù)。更換燈數(shù)及產(chǎn)品系列號等
注:外型尺寸:398*149*267mm 重量:10 kg 電源功率:220V ± 10%,50H Z , 40W