蛋白Pull down技術將目標蛋白進行體外原核表達，使標簽蛋白（Halo、GST、His等）與目標蛋白融合表達，可以不受抗體、物種限制僅借助標簽的親和介質(zhì)將目標蛋白純化出來，目標蛋白在純化過程中可以將與其能夠發(fā)生作用的蛋白“下拉”下來，進而利用蛋膠、Western Blot或者質(zhì)譜鑒定拉下來的蛋白質(zhì)，這些蛋白即與目標蛋白相互作用的蛋白。蛋白Pull down實驗還可以通過外源同時表達目標蛋白和待測蛋白，利用Pull down點對點的確定它們是否發(fā)生直接的相互作用，也可以僅表達蛋白質(zhì)的結合區(qū)域進行蛋白Pull down，確定兩個蛋白結合的結構域。
本公司主要提供Halo/GST-tag pull down：Halo-tag pull down是使用體外真核表達系統(tǒng)來表達目的蛋白，表達的目的蛋白攜帶Halo標簽；GST-tag pull down是使用大腸桿菌誘導表達目的蛋白，表達的目的蛋白攜帶GST標簽，也可以利用其它標簽蛋白進行pull down實驗。
Halo/FLAG-tag pull down技術優(yōu)勢：
真核表達系統(tǒng)，蛋白更接近體內(nèi)結構
沒有細胞內(nèi)干擾因素的限制，表達成功率高
蛋白表達載體構建成功后，不需要轉(zhuǎn)化和鑒定，可直接表達目的蛋白，節(jié)省時間
| 步驟 | 內(nèi)容 | 交付內(nèi)容 | 周期 |
| 載體構建 |
| 測序結果 | 1-2周 |
| 無細胞表達+純化 |
| 表達評估報告 | 1周 |
| Pull Down |
| 銀染結果 | 1周 |
| 質(zhì)譜檢測 |
| 質(zhì)譜結果 | 2周 |
| 客戶提供材料 | 交付結果 |
| 新鮮樣本（組織或者細胞）：細胞數(shù)量>2.7ⅹ107； 組織樣本>3g | 載體測序結果 實驗過程圖 質(zhì)譜結果 |
蛋白Pull Down結果示例
蛋白Pull Down應用案例
2023年12月，北京林業(yè)大學和藍景科信合作，在植物學主流學術期刊Plant Stress（IF=5.0）上，發(fā)表了題為“Populus euphratica CPK21 interacts with heavy metal stress-associated proteins to mediate Cd tolerance in Arabidopsis”的研究成果。該研究借助HaloTag pull-down技術鑒定了胡楊CPK21的互作蛋白，為揭示胡楊CPK21調(diào)控植物Cd耐受的分子機制研究提供了技術支撐。
