流式細(xì)胞儀系統(tǒng) NovoCyte Quanteon 配備4激光
NovoCyte Quanteon 是大獲成功的 NovoCyte 流式細(xì)胞儀系列的新一代產(chǎn)品。Quanteon 為 4 激光流式細(xì)胞儀，可以配置多達(dá) 25 個(gè)獨(dú)立的光電倍增管，滿足各種高要求的樣品 panel。Quanteon 采用專(zhuān)有的光電倍增管技術(shù)，提供出色的靈敏度、穩(wěn)定性及寬達(dá) 7.2 個(gè)數(shù)量級(jí)的動(dòng)態(tài)范圍。可以在同一個(gè)視圖中對(duì)極弱和的熒光信號(hào)進(jìn)行捕獲并設(shè)門(mén)，無(wú)需費(fèi)時(shí)費(fèi)力的反復(fù)調(diào)整 PMT。
在開(kāi)發(fā)復(fù)雜多色 panel 時(shí)，Quanteon 可節(jié)省數(shù)小時(shí)的設(shè)置和分析時(shí)間。出色的液路系統(tǒng)提供穩(wěn)定、一致的樣品輸送，具有高重現(xiàn)性和極低的 CV。體積法計(jì)數(shù)功能無(wú)需使用昂貴的微球，節(jié)省您的時(shí)間和金錢(qián)。
特性
- 全自動(dòng)清洗和關(guān)機(jī)功能使操作更加簡(jiǎn)單
- 使用 NovoSampler Q 實(shí)現(xiàn)高效、無(wú)人值守的自動(dòng)化操作
- 靈活的樣品處理，即使對(duì)于非常小的樣品體積也能實(shí)現(xiàn)有效的混合，此外還兼容的孔板形式、條形碼和實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化系統(tǒng)的內(nèi)置 API。
- 簡(jiǎn)便易用的 NovoExpress 軟件提供自動(dòng)補(bǔ)償功能、細(xì)胞周期分析模塊、細(xì)胞增殖模塊、熱圖和批處理功能。
性能指標(biāo)
| 激光器數(shù)量 |
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| 激光器配置 |
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| 熒光通道 |
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工作原理
的光電檢測(cè)器
硅光電倍增管 (SiPM) 是基于硅基底的固態(tài)半導(dǎo)體器件，具備光子能級(jí)靈敏度，動(dòng)態(tài)范圍為 7.2 個(gè)數(shù)量級(jí)。SiPM 是一款具有光子計(jì)數(shù)功能的緊湊檢測(cè)器，由設(shè)計(jì)緊湊、可同時(shí)運(yùn)行的雪崩光電二極管陣列組成。NovoCyte Quanteon 設(shè)計(jì)中的創(chuàng)新光學(xué)器件包含 25 個(gè)獨(dú)立的 SiPM，可收集并處理來(lái)自每個(gè)熒光通道的信號(hào)。
出色的散射光分辨率，可檢測(cè)小顆粒
NovoCyte Advanteon 散射光檢測(cè)光學(xué)系統(tǒng)和信號(hào)處理電子器件經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可以分辨粒徑小至 0.1 µm 的顆粒。憑借這種優(yōu)異的分辨率，可輕松識(shí)別和分析血小板、細(xì)菌和各種亞微米顆粒。
高重現(xiàn)性和穩(wěn)定性
Quanteon 的液路系統(tǒng)專(zhuān)為提供高性能而設(shè)計(jì)。Quanteon 擁有其他流式細(xì)胞儀的液路一致性和穩(wěn)定性。使用蠕動(dòng)泵的其他儀器通常會(huì)受到液路脈動(dòng)的影響，導(dǎo)致細(xì)胞計(jì)數(shù)不一致和不準(zhǔn)確。
應(yīng)用
凋亡分析
細(xì)胞凋亡也稱(chēng)為細(xì)胞程序性死亡，是細(xì)胞調(diào)控自身死亡的過(guò)程，通過(guò)激活特定通路使細(xì)胞發(fā)生收縮、凝聚，并最終通過(guò)吞噬作用被清除。這與壞死細(xì)胞死亡形成鮮明對(duì)比，壞死細(xì)胞死亡時(shí)細(xì)胞失控死亡并裂解，可產(chǎn)生免疫反應(yīng)異常激活等有害影響。因此，凋亡細(xì)胞以非常有序的方式死亡，可限制其對(duì)周?chē)?xì)胞和組織的破壞。
多種方法可用于測(cè)定細(xì)胞死亡并區(qū)分其為凋亡還是壞死。NovoCyte 流式細(xì)胞儀具有自動(dòng)補(bǔ)償設(shè)置和寬熒光檢測(cè)動(dòng)態(tài)范圍，可輕松對(duì)分析進(jìn)行定量，無(wú)需調(diào)整 PMT 電壓
免疫表型分析
免疫狀態(tài)與疾病狀態(tài)、治療效率以及對(duì)疫苗等外部刺激的反應(yīng)有關(guān)。免疫表型分析可快速識(shí)別候選細(xì)胞類(lèi)型、亞類(lèi)和功能。由于免疫細(xì)胞可能影響疫苗的免疫原性及其效能，因此監(jiān)測(cè)多種免疫細(xì)胞群的頻率以及特定細(xì)胞亞群（如單核細(xì)胞、NK 細(xì)胞、T 細(xì)胞和 B 細(xì)胞）的分化或活化狀態(tài)至關(guān)重要。NovoCyte 流式細(xì)胞儀可同時(shí)定量分析多種白細(xì)胞，以便更好地了解患者的免疫狀態(tài)并監(jiān)測(cè)機(jī)體對(duì)傳染病的免疫反應(yīng)。
細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)檢測(cè)
對(duì)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的檢測(cè)和分析有助于細(xì)胞亞群和細(xì)胞過(guò)程的額外表征。為分析非細(xì)胞表面蛋白質(zhì)，需要進(jìn)行細(xì)胞固定和破膜。然而，許多磷酸特異性抗體與許多基于去垢劑的常用破膜方法（用于細(xì)胞內(nèi)染色）不兼容。在確定磷酸特異性抗體的適宜固定和破膜方法時(shí)，需要特別注意。見(jiàn)的方法是用 1.5% 多聚甲醛固定，然后用 99% 甲醇破膜。雖然這種方法適用于多種抗體，但請(qǐng)注意，并非每種磷酸特異性抗體都適用。
此外，在異質(zhì)性樣品中鑒定不同的細(xì)胞群，需要對(duì)表面蛋白連接的磷酸化蛋白進(jìn)行染色。必須特別考慮這些表位對(duì)固定劑的敏感性，并采取相應(yīng)預(yù)防措施，避免損害表位。因此，樣品在固定前可能需要對(duì)特定的表面標(biāo)記物進(jìn)行染色
細(xì)胞周期分析
正常的人體細(xì)胞是含有恒定數(shù)量 DNA 的二倍體。在細(xì)胞分裂的過(guò)程中，DNA 合成導(dǎo)致總 DNA 含量翻倍，隨后在有絲分裂后恢復(fù)正常的 DNA 含量。利用 NovoCyte 流式細(xì)胞儀，可以進(jìn)行詳細(xì)的細(xì)胞周期分析，了解腫瘤細(xì)胞分化、細(xì)胞轉(zhuǎn)化以及細(xì)胞與化合物之間的相互作用。
圖：在 10 µg/M MG132 或 500 µg/M 5-FU 處理 16 小時(shí)后，使用 ACEA NovoCyte 流式細(xì)胞儀分析 A549 細(xì)胞的細(xì)胞周期分布。NovoExpress 內(nèi)置的細(xì)胞周期分析模塊中的圖像顯示了處于 G0/G1 期（綠色）、S 期（黃色）和 G2/M 期（藍(lán)色）的細(xì)胞。與正常未處理的細(xì)胞相比，MG132 處理的細(xì)胞停滯在 G2/M 期，而 5-FU 處理的細(xì)胞停滯在 G0/G1 期。
細(xì)胞增殖
細(xì)胞增殖是一種重要功能，是高度結(jié)構(gòu)化的事件，如果不受控制，會(huì)導(dǎo)致疾病。我們可以通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)或使用染料（例如 CFSE）測(cè)量增殖。當(dāng) CFSE 標(biāo)記的細(xì)胞發(fā)生分裂時(shí)，染料在子細(xì)胞之間平均分配，隨著染料的不斷稀釋?zhuān)覀兛梢詼y(cè)量 CFSE 熒光隨時(shí)間的損失。此外，還繪制染料的平均熒光強(qiáng)度 (MFI) 與細(xì)胞濃度隨時(shí)間的變化曲線，以揭示兩者之間的反比關(guān)系。這類(lèi)分析方法通常用于觀察 T 淋巴細(xì)胞活化的變化。
圖：使用 CFSE 測(cè)量 Jurkat T 細(xì)胞增殖。A) 使用 CFSE 標(biāo)記 Jurkat T 細(xì)胞，并通過(guò) NovoCyte 流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞隨時(shí)間的變化，以測(cè)定細(xì)胞分裂。每個(gè)峰值都對(duì)應(yīng)于一個(gè)單獨(dú)的時(shí)間點(diǎn)。B) 使用隨細(xì)胞分裂產(chǎn)生的信號(hào)稀釋?zhuān)L制細(xì)胞計(jì)數(shù)與 CFSE 的平均熒光強(qiáng)度 (MFI) 隨時(shí)間的變化曲線。
