流式細(xì)胞儀系統(tǒng) Novocyte Advanteon配備 1 至 3 個(gè)激光器
NovoCyte Advanteon 流式細(xì)胞儀建立在大獲成功的 NovoCyte 和 NovoCyte Quanteon 基礎(chǔ)之上。該系統(tǒng)為高要求的科學(xué)家們提供了一套*的功能，而且操作非常簡(jiǎn)單。NovoCyte Advanteon 能夠適應(yīng)且日益復(fù)雜的多色流式細(xì)胞檢測(cè)。該系統(tǒng)可靈活配置 1 至 3 個(gè)激光器，并提供最多 21 個(gè)熒光通道和 23 個(gè)獨(dú)立的檢測(cè)器。
NovoCyte Advanteon 可針對(duì)您的特定需求量身定制，同時(shí)可輕松升級(jí)以滿足您未來的需求。當(dāng)需要實(shí)現(xiàn)高通量檢測(cè)時(shí)，可以將 NovoSampler Q 集成到不同的實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化平臺(tái)中。這款進(jìn)樣器可以高效處理 FACS 管（使用 40 管流式管架）和 24、48、96 及 384 孔板。對(duì)于 NovoCyte Advanteon 而言，直觀且享譽(yù)業(yè)界的 NovoExpress 軟件現(xiàn)在更加*，能夠在數(shù)據(jù)采集、分析和報(bào)告方面提供的用戶體驗(yàn)。
特性
- 更高靈活性，使用 1 至 3 個(gè)激光器提供多達(dá) 21 種顏色選擇，支持定制和升級(jí)
- 樣品回收模式用于在采集結(jié)束時(shí)收集未使用的樣品
- 出色的靈敏度和分辨率
- 直觀且強(qiáng)大的軟件，用于數(shù)據(jù)采集、分析和報(bào)告
- 智能設(shè)計(jì)功能和無人值守操作，可簡(jiǎn)化您的工作流程
- 自動(dòng)化功能，可滿足高通量檢測(cè)需求
- 動(dòng)態(tài)范圍寬達(dá) 7.2 個(gè)數(shù)量級(jí)，無需調(diào)節(jié)增益檢測(cè)器電壓
- 高速采集，采集速率高達(dá) 100000 事件/秒
- 每個(gè)實(shí)驗(yàn)中均能實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù)，無需使用參比微球
性能指標(biāo)
| 激光器數(shù)量 |
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| 激光器配置 |
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| 熒光通道 |
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工作原理
的光電檢測(cè)器
硅光電倍增管 (SiPM) 是基于硅基底的固態(tài)半導(dǎo)體器件，具備光子能級(jí)靈敏度，動(dòng)態(tài)范圍為 7.2 個(gè)數(shù)量級(jí)，是一款具有光子計(jì)數(shù)功能的緊湊檢測(cè)器。NovoCyte Advanteon 設(shè)計(jì)中的創(chuàng)新光學(xué)器件包含 21 個(gè)獨(dú)立的 SiPM，可收集并處理來自每個(gè)熒光通道的信號(hào)。
出色的散射光分辨率，可檢測(cè)小顆粒
NovoCyte Advanteon 散射光檢測(cè)光學(xué)系統(tǒng)和信號(hào)處理電子器件經(jīng)過優(yōu)化，可以分辨粒徑小至 0.1 µm 的顆粒。憑借這種優(yōu)異的分辨率，可輕松識(shí)別和分析血小板、細(xì)菌和各種亞微米顆粒。
無論流速快慢，結(jié)果保持一致
NovoCyte Advanteon 的流體反饋控制機(jī)制可始終確保非常穩(wěn)定的流速。各種樣品流速下均能實(shí)現(xiàn)出色的穩(wěn)定性，可在不同的操作條件下提供一致的結(jié)果。如圖所示，與市面上其他系統(tǒng)相比，不同流速下的 CVs 顯著降低。
應(yīng)用
凋亡分析
細(xì)胞凋亡也稱為細(xì)胞程序性死亡，是細(xì)胞調(diào)控自身死亡的過程，通過激活特定通路使細(xì)胞發(fā)生收縮、凝聚，并最終通過吞噬作用被清除。這與壞死細(xì)胞死亡形成鮮明對(duì)比，壞死細(xì)胞死亡時(shí)細(xì)胞失控死亡并裂解，可產(chǎn)生免疫反應(yīng)異常激活等有害影響。因此，凋亡細(xì)胞以非常有序的方式死亡，可限制其對(duì)周圍細(xì)胞和組織的破壞。
多種方法可用于測(cè)定細(xì)胞死亡并區(qū)分其為凋亡還是壞死。NovoCyte 流式細(xì)胞儀具有自動(dòng)補(bǔ)償設(shè)置和寬熒光檢測(cè)動(dòng)態(tài)范圍，可輕松對(duì)分析進(jìn)行定量，無需調(diào)整 PMT 電壓
免疫表型分析
免疫狀態(tài)與疾病狀態(tài)、治療效率以及對(duì)疫苗等外部刺激的反應(yīng)有關(guān)。免疫表型分析可快速識(shí)別候選細(xì)胞類型、亞類和功能。由于免疫細(xì)胞可能影響疫苗的免疫原性及其效能，因此監(jiān)測(cè)多種免疫細(xì)胞群的頻率以及特定細(xì)胞亞群（如單核細(xì)胞、NK 細(xì)胞、T 細(xì)胞和 B 細(xì)胞）的分化或活化狀態(tài)至關(guān)重要。NovoCyte 流式細(xì)胞儀可同時(shí)定量分析多種白細(xì)胞，以便更好地了解患者的免疫狀態(tài)并監(jiān)測(cè)機(jī)體對(duì)傳染病的免疫反應(yīng)。
細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)檢測(cè)
對(duì)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的檢測(cè)和分析有助于細(xì)胞亞群和細(xì)胞過程的額外表征。為分析非細(xì)胞表面蛋白質(zhì)，需要進(jìn)行細(xì)胞固定和破膜。然而，許多磷酸特異性抗體與許多基于去垢劑的常用破膜方法（用于細(xì)胞內(nèi)染色）不兼容。在確定磷酸特異性抗體的適宜固定和破膜方法時(shí)，需要特別注意。見的方法是用 1.5% 多聚甲醛固定，然后用 99% 甲醇破膜。雖然這種方法適用于多種抗體，但請(qǐng)注意，并非每種磷酸特異性抗體都適用。
此外，在異質(zhì)性樣品中鑒定不同的細(xì)胞群，需要對(duì)表面蛋白連接的磷酸化蛋白進(jìn)行染色。必須特別考慮這些表位對(duì)固定劑的敏感性，并采取相應(yīng)預(yù)防措施，避免損害表位。因此，樣品在固定前可能需要對(duì)特定的表面標(biāo)記物進(jìn)行染色
細(xì)胞周期分析
正常的人體細(xì)胞是含有恒定數(shù)量 DNA 的二倍體。在細(xì)胞分裂的過程中，DNA 合成導(dǎo)致總 DNA 含量翻倍，隨后在有絲分裂后恢復(fù)正常的 DNA 含量。利用 NovoCyte 流式細(xì)胞儀，可以進(jìn)行詳細(xì)的細(xì)胞周期分析，了解腫瘤細(xì)胞分化、細(xì)胞轉(zhuǎn)化以及細(xì)胞與化合物之間的相互作用。
圖：在 10 µg/M MG132 或 500 µg/M 5-FU 處理 16 小時(shí)后，使用 ACEA NovoCyte 流式細(xì)胞儀分析 A549 細(xì)胞的細(xì)胞周期分布。NovoExpress 內(nèi)置的細(xì)胞周期分析模塊中的圖像顯示了處于 G0/G1 期（綠色）、S 期（黃色）和 G2/M 期（藍(lán)色）的細(xì)胞。與正常未處理的細(xì)胞相比，MG132 處理的細(xì)胞停滯在 G2/M 期，而 5-FU 處理的細(xì)胞停滯在 G0/G1 期。
細(xì)胞增殖
細(xì)胞增殖是一種重要功能，是高度結(jié)構(gòu)化的事件，如果不受控制，會(huì)導(dǎo)致疾病。我們可以通過細(xì)胞計(jì)數(shù)或使用染料（例如 CFSE）測(cè)量增殖。當(dāng) CFSE 標(biāo)記的細(xì)胞發(fā)生分裂時(shí)，染料在子細(xì)胞之間平均分配，隨著染料的不斷稀釋，我們可以測(cè)量 CFSE 熒光隨時(shí)間的損失。此外，還繪制染料的平均熒光強(qiáng)度 (MFI) 與細(xì)胞濃度隨時(shí)間的變化曲線，以揭示兩者之間的反比關(guān)系。這類分析方法通常用于觀察 T 淋巴細(xì)胞活化的變化。
圖：使用 CFSE 測(cè)量 Jurkat T 細(xì)胞增殖。A) 使用 CFSE 標(biāo)記 Jurkat T 細(xì)胞，并通過 NovoCyte 流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞隨時(shí)間的變化，以測(cè)定細(xì)胞分裂。每個(gè)峰值都對(duì)應(yīng)于一個(gè)單獨(dú)的時(shí)間點(diǎn)。B) 使用隨細(xì)胞分裂產(chǎn)生的信號(hào)稀釋，繪制細(xì)胞計(jì)數(shù)與 CFSE 的平均熒光強(qiáng)度 (MFI) 隨時(shí)間的變化曲線。
