1、原理及適用范圍

蠟樣芽孢桿菌（Bacillus cereus）在自然界分布廣泛，在各種食品中的檢出率也較高，往往是食品在食用前保存溫度不當(dāng)，放置時(shí)間過長，使污染在食品中的蠟樣芽孢桿菌或殘存的芽孢得以生長繁殖，或是由于含有蠟樣芽孢桿菌產(chǎn)生的熱穩(wěn)定毒素，而導(dǎo)致食物中毒的發(fā)生。中毒的發(fā)病率較高，一般為60%～99%。

蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片(FilmplateTM Bacillus cereus BL210)是一種商品化的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品，由選擇性培養(yǎng)基、高分子吸水凝膠和專一性酶指示劑等構(gòu)成，一步培養(yǎng)顯色就可確認(rèn)是否原菌的存在，大大地簡化了檢測(cè)程序，對(duì)于提高細(xì)菌性食物中毒突發(fā)事件的反應(yīng)能力具有重要的作用，同時(shí)也可在食品生產(chǎn)企業(yè)使用。本產(chǎn)品適用于乳制品、肉類、淀粉類食品、各種甜點(diǎn)等的快速檢測(cè)。 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)蠟樣芽孢桿菌檢驗(yàn)（GB/T 4789.14）。

2、操作方法

2.1、樣品處理：取樣品25mL（g）放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液（或生理鹽水）的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，制成1:10的樣品勻液。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL，注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi)，振搖后成為1:100的樣品勻液。

2.2、接種：將蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片(BL210)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，揭開上層膜，用無菌吸管每個(gè)梯度各取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置10s左右，使培養(yǎng)基凝固，每個(gè)稀釋度接種兩片，同時(shí)做一片空白對(duì)照。

2.3、培養(yǎng)：將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中，并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。

3、結(jié)果判讀

對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察，呈藍(lán)綠色的菌落為蠟樣芽孢桿菌。對(duì)于出現(xiàn)陽性菌落的樣品，用其他方法作進(jìn)一步的鑒定。

4、附加說明

4.1、本產(chǎn)品具有很好的特異性，接種蠟樣芽孢桿菌純菌株產(chǎn)生典型的藍(lán)綠色點(diǎn)，而大部分非目標(biāo)菌如大腸桿菌、大腸桿菌O157、沙門氏菌、、副溶血弧菌和阪崎腸桿菌等均被抑制。

4.2、初步試驗(yàn)表明，蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片對(duì)純菌的檢測(cè)限為1cfu/mL。用蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片檢測(cè)了23種食品樣品，同時(shí)接種平皿做對(duì)比試驗(yàn)。測(cè)試片檢出陽性樣品7個(gè)，檢出率為30.4％；用平皿法檢出陽性樣品6個(gè)，檢出率為26.1％，測(cè)試片法比平皿法高了4.3％。

4.3、注意使用過的測(cè)試片上帶有活菌，需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理 。

5、保存條件

本產(chǎn)品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質(zhì)期為一年，鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中，一個(gè)月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水，在拆封前將整包回溫至室溫。