MCF7 (MCF-7) (乳腺癌細胞)-上海邦景實業(yè)有限公司

貨號	BJ-X96468

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產品名稱	MCF7 (MCF-7) (乳腺癌細胞)
規(guī)格	1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號	BJ-X96468

商品屬性：

名稱 MCF7 (MCF-7) (乳腺癌細胞)

別稱MCF 7; MCF.7; MCF7; Michigan Cancer Foundation-7; ssMCF-7; ssMCF7; MCF7/WT; IBMF-7; MCF7-CTRL

種屬人類

年齡（性別）女性，69歲

組織來源乳腺，乳房；源自轉移部位：胸腔積液

生長特性貼壁細胞

細胞形態(tài)上皮細胞樣

背景描述MCF7 [MCF-7]細胞保留了多個分化了的乳腺上皮的特性，包括：能通過胞質雌激素受體加工雌二醇并能形成圓形復合物。MCF7 [MCF-7]細胞含有Tx-4癌基因；腫瘤壞死因子α可以抑制MCF7 [MCF-7]細胞的生長，抗雌激素處理MCF7 [MCF-7]細胞能調變IGFBP'S的分泌。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基MEM＋0.01mg/ml Insulin＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:2-1:3

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時間~30-72小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

受體表達情況estrogen receptor, expressed

抗原表達情況Blood Type O; Rh+

基因表達情況insulin-like growth factor binding proteins (IGFBP) BP-2; BP-4; BP-5

細胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

圖片13.jpg

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

大鼠 CD27 基因全長ORF克隆

大鼠 TNFRSF13B 基因全長ORF克隆

大鼠 TNFRSF17 基因全長ORF克隆

大鼠 TNFRSF21 基因全長ORF克隆

大鼠 TNFSF12 基因全長ORF克隆

大鼠 CXCL17 基因全長ORF克隆

大鼠 TNFSF10 基因全長ORF克隆

大鼠 TNFSF15 基因全長ORF克隆

大鼠 CXCL16 基因全長ORF克隆

大鼠 TNFSF8 基因全長ORF克隆

MCF7 (MCF-7) (乳腺癌細胞) 1g 熒光增白劑 28 Fluorescent Brightener 28 室溫干燥保存 0.312-20 ng/mL 腦膜炎奈瑟菌C群(NM-C)核酸檢測試劑盒

1瓶 HCC38株 HCC38 低溫運輸和保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Angiopoietin-4

10％氯化鈉胰酪胨大豆肉湯 10% NaCl Tryptic Soy Broth 250g 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Hydroxymethylglutaryl-CoA synthase, cytoplasmic

250mL Formalin-Zinc Solution Formalin-Zinc Solution 常溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Platelet glycoprotein IX

布氏瓊脂 Brucella Agar 250g

硝酸鹽還原試劑盒 5ml*4氯化鈉血瓊脂基礎進口、國產Sodium Chloride Blood Agar Base用于副溶血性弧菌的溶血試驗250

木糖賴脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基（2015藥典） 250g 0.156-10 ng/mL 人因子受體共有亞基gamma(Cytokine receptor common subunit gamma)ELISA試劑盒

50次柱式血液RNAout Column Blood RNAOUT 4℃保存改良LETHEEN瓊脂基礎進口、國產LETHEEN AGAR BASE, MODIFIED用于化妝品中微生物檢測(Acumedia 方法)250

菌落總數(shù)檢測培養(yǎng)基

N6培養(yǎng)基 N6 Medium 250g

100mL 曲拉通 X-100 Triton X-100 室溫保存 0.39-25 ng/mL ELISA Kit for Glutamine

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。