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貨號 | BJ-X96961 |
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商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96961 |
商品介紹:
名稱 L-WRN(小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞) 年齡(性別)100 days 生長特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 背景描述L-WRN細(xì)胞通過R-spondin 3和noggin共表達(dá)載體轉(zhuǎn)染L-Wnt3A 獲得,并在含有G418和濕霉素b的培養(yǎng)基中選擇穩(wěn)定克隆。 生物安全等級2 生長培養(yǎng)基DMEM+10% FBS(164210-50)+0.5 mg/mL G-418+0.5 mg/mL hygromycin B+1% P/S 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。
重組人 PDGFRa / CD140a 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
重組人 EphA4 / HEK8 蛋白 (aa 570-986, His & GST 標(biāo)簽)
重組人 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (aa 444-913, His & GST 標(biāo)簽)
重組人 c-MET / HGFR 蛋白 (aa 956-1390, His & GST 標(biāo)簽)
重組人 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 (aa 422-855, His & GST 標(biāo)簽)
重組小鼠
L-WRN(小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞)30次 DNA快速連接試劑盒 Rapid DNA Ligation Kit -20℃保存 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Lactoylglutathione lyase
1000 U 限制性內(nèi)切PstI Restriction Endonuclease -20℃保存 0.312-20 ng/mL 鯉春病毒(SVCV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)
100g 矮壯素 Chlormequat 室溫保存葡萄糖銨培養(yǎng)基 進(jìn)口、國產(chǎn)Ammonium Dextrose Medium用于志賀氏菌的葡萄糖銨試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))250
2 ug pLVX-EF1α-IRES-mCherry pLVX-EF1α-IRES-mCherry 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 62.5-4000 pg/mL 人膽囊收縮素/腸促肽(CCK)ELISA試劑盒
50mL RIPA Buffer with Triton, 5X RIPA Buffer with Triton, 5X 常溫保存 6.25-400 pg/mL 人蛋白u(yù)nc-13 同源物C(UNC13C)ELISA試劑盒
(100IU)和亞碲酸鉀(1mg)混合液 1ml*5支/盒 7.8-500 pg/mL 人干擾素α-8(IFN-alpha-8)ELISA試劑盒
1瓶 AAV-293株 AAV-293 低溫運(yùn)輸和保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Cocaine- and amphetamine-regulated transcript protein
2 ug pBAD His A pBAD His A 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 62.5-4000 pg/mL ELISA Kit for Human Keratin, type I cytoskeletal 18
10mg 5- 氟 -5’- 脫氧尿苷 5’dFUrd (5-Fluoro-5’Deoxyuridine) 室溫保存 0.156-10 ng/mL 人μ阿片受體(M-OR-1)ELISA試劑盒
1瓶 THLE-3株 THLE-3 低溫運(yùn)輸和保存 0.312-20 ng/mL 人整合素α-M(Integrin alpha-M)ELISA試劑盒
250mL Veronal Buffered Saline with EDTA (VBSE) Veronal Buffered Saline with EDTA (VBSE) 常溫保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Platelet endothelial cell adhesion molecule
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
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