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貨號 | BJ-X96789 |
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培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96789 |
商品介紹:
名稱 Super Tube (狗腎細胞) 別稱MDCK supertube; SuperTube 種屬狗 年齡(性別)雌性,成年 組織來源正常腎 生長特性貼壁細胞 細胞形態(tài)上皮細胞樣 背景描述從表觀正常的成年雌性可卡犬中建立了細胞株MDCK,從中克隆建立了狗上皮樣細胞株Super Tube細胞。當維持高細胞濃度時,Super Tube細胞形成大量的小管(據(jù)報道,24孔板的每孔鋪7×10^5細胞,3天內(nèi)就能形成小管)。要形成小管,Super Tube細胞需要每天兩次換液以提供足夠養(yǎng)分。與原始細胞株相比,Super Tube細胞的c-AMP的檢測水平低得多,在毛喉素刺激下讀出的腺苷環(huán)化酶水平也低;Super Tube細胞的跨上皮抗性也比Super Dome和MDCK都低。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基DMEM/F12+0.05mM NEAA+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
大鼠 CD157 / BST1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD157 / BST1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD79B / B29 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 KIT / c-KIT 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD68 / Macrosialin 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 人細胞裂解
Super Tube (狗腎細胞)2 ug pEF1/myc-His B pEF1/myc-His B 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pENTR1A pENTR1A 低溫運輸,-20℃保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Ras-related protein Rab-11A
腸道菌增菌液體培養(yǎng)基(2015藥典) 250g 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Pendrin
馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基 Potato Agar Medium 250g 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Stromal cell-derived factor 1
鹽緩沖液(pH7.2) PBS broth 250g 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Fatty acid-binding protein, heart
50T 呼吸道合胞病毒A組PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Pyruvate dehydrogenase E1 component subunit alpha, testis-specific form, mitochondrial
1瓶 JeKo-1株 JeKo-1 低溫運輸和保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Serpin A11
1g 氯吡苯脲 Forchior Fennron 室溫保存 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Lipoxin B4
亞碲酸鉀血瓊脂基礎(chǔ) Potassium Tellurite Blood Agar Base 250g 0.156-10 ng/mL 人 整合素α2B(ITGα2B)ELISA試劑盒
2 ug pLAPSN pLAPSN 低溫運輸,-20℃保存胰酪胨大豆肉湯基礎(chǔ) 進口、國產(chǎn)Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base用于蠟樣芽孢桿菌的MPN值測定 (SN標準)250
250g 干粉型SOC培養(yǎng)基 SOC Medium Powder 常溫
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