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實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細(xì)胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。

人 LYPD3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

人 POFUT2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

人 FETUB 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

人 FGF23 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

人 IL20 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

人 CD1B 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

人 IL22 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

人 IL3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

人 KLK4 基因全長ORF克隆 (表

ZR-75-30 (乳腺癌細(xì)胞)2 ug pESC-TRP pESC-TRP 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人外周髓鞘蛋白22(PMP-22)ELISA試劑盒

2 ug pSP73 pSP73 低溫運輸，-20℃保存 0.78-50 ng/mL 人脂質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白(CETP)ELISA試劑盒

1g 苯 Phenylmethyl Sulfonyl Fluoride（PMSF） 室溫保存 0.312-20 ng/mL. 人外因子蛋白10b(Protein Wnt-10b) ELISA試劑盒

100mL TES Buffer,0.2M,pH7.0  TES Buffer,0.2M,pH7.0  常溫保存 3.12-200 ng/mL 人干因子受體(SCFR/CD117/C-試劑盒)ELISA試劑盒

1瓶 U87MG株 U87MG 低溫運輸和保存 0.156-10 ng/mL 人表皮調(diào)節(jié)素(EPR/EREG)ELISA試劑盒

龍膽紫血液瓊脂基礎(chǔ) Crystal violet blood agar base 250g糖發(fā)酵基礎(chǔ)肉湯   進(jìn)口、國產(chǎn)Bromcresol Purple Broth Base適用于微生物檢驗中各種糖發(fā)酵實驗，無菌加入各種糖醇類物質(zhì)（SN標(biāo)準(zhǔn)）250

50 T GSH—PX測試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存 0.78-50 ng/mL 人(Tyrosinase)ELISA試劑盒

利茲不動桿菌培養(yǎng)基 Leeds Acinetobacter Medium 250g 0.156-10 ng/ml ELISA Kit for Human Peroxiredoxin-2

100g 纖維素 DE-52 Cellulose，DE-52 室溫干燥保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Lipoteichoic acid

1mL 5-Fluorouracil（5-氟脲） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Hematopoietic prostaglandin D synthase

100mL RIPA裂解液（中） RIPA Lysis Buffer（M） -4℃保存酪蛋白水解物進(jìn)口、國產(chǎn)Casamino acid100克BR

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。