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小鼠視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)elisa進(jìn)口試劑盒
我司供應(yīng)的elisa進(jìn)口試劑盒免費(fèi)代測,全程ELISA試劑盒實(shí)驗技術(shù)指導(dǎo),免費(fèi)代做實(shí)驗,索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格:96T/48T
特點(diǎn):靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
用途:科研實(shí)驗等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷
運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運(yùn)輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等
產(chǎn)品名稱 | 小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)elisa進(jìn)口試劑盒 |
英文名稱 | Mouse leptin receptor (LR/Ob-R) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G9915 |
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備試劑與收集血樣:
1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗前準(zhǔn)備:
ELISA進(jìn)口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
CSF1R Others Human 人 M-CSFR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 舒尼替尼堿質(zhì)量規(guī)格:>98.5%Sunitinib base
CM-R004大鼠氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL舒尼替尼堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Sunitinib base
FGFR4 Others Rat 大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硫酸奈替米星質(zhì)量規(guī)格:≥595 µg/mg,BRNetilmicin Sulfate
小鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL硫酸奈替米星(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Netilmicin Sulfate
THP1-Blue-CD14(穩(wěn)定株)人單核細(xì)胞 THP1-Blue-CD14 (stable sain) in human monocytes 1640+10% FBS(熱滅活)+200ug/ml Zeocin+10ug/ml Blasticidin S+0.05mM β-ME制霉菌素質(zhì)量規(guī)格:USP級,4400u/mgNystatin
髓核細(xì)胞培養(yǎng)基NPCM-prf四氫小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Tetrahydroberberine,THB
IL24 Others Human 人 IL-24 / Ierleukin-24 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 通關(guān)藤苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Tenacissoside I
DCE 雞胚成纖維細(xì)胞通關(guān)藤苷G(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Tenacissoside G
CM-M093小鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL白花前胡丙素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Praeruptorin C
293T, SV40轉(zhuǎn)化的人胚腎上皮細(xì)胞系半乳糖(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:供檢查用D-GALACTOSE 1-[2-(2-AZIDOETHOXY)ETHOXYETHYL]-2,3,4,6-TETRA-O-ACETATE
IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169)caonactivated色素碳25克AR,80%
NCI-H838(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Hep G2(肝癌細(xì)胞)言醋頭孢吡1 CqfqpiMq xy7nochloridq 13171-29-2
CL-0416Psi2 DAP(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2VCR長春新堿硫化物17.5KUUSP級,88%,920u/mg
VTCN1 Others Human 人 B7-H4 / B7S1 / B7x 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) HEPPSOFREEACIDHEPPSO, FREE ACID超級100G68399-78-0RT
人表皮色素細(xì)胞-中色素RNAHEM-m miRNA5 μgActidione 100mg Sigma分裝
小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)elisa進(jìn)口試劑盒HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Viet Nam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 焦1酸(>45%,BR)Pyrophosphoric acid質(zhì)量規(guī)格:>45%,BR
MDA-MB-436 人腺癌細(xì)胞奎寧(>98%,BC)Quinine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
NCI-H358人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H358 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS土耳其紅油Red oil質(zhì)量規(guī)格:BR
KITLG Protein Human 重組人 SCF / C-kit ligand 蛋白 (aa 1-189, His 標(biāo)簽)倒千里光堿Retrorsine質(zhì)量規(guī)格:>90%,進(jìn)分
人胚胎腸粘膜組織來源細(xì)胞;CCC-HIE-2 人肺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL羅丹明B基(>97%,BS)Rhodamine B base質(zhì)量規(guī)格:>97%,BS
實(shí)驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到 98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
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