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小鼠視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)elisa進(jìn)口試劑盒
我司供應(yīng)的elisa進(jìn)口試劑盒免費(fèi)代測,全程ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo),免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn),索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格:96T/48T
特點(diǎn):靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷
運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運(yùn)輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等
產(chǎn)品名稱 | 小鼠泛素蛋白(Ub)elisa進(jìn)口試劑盒 |
英文名稱 | Mouse ubiquitin protein (Ub) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G9852 |
備試劑與收集血樣:
1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA進(jìn)口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
FAM3D Protein Mouse 重組小鼠 FAM3D / Oit1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(3R,5S)氟伐他汀鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口(3S,5R) Fluvastatin Salt
小鼠背部脊髓神經(jīng)元(MN-dsc)(1×106) DU 145, 人前列腺癌細(xì)胞 Human(3R,5S)-氟伐他汀鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口(3R,5S)-Fluvastatin Salt
中國倉鼠卵巢細(xì)胞-二氫葉酸還原酶缺陷型;CHO/dhFr-氟伐他汀質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Fluvastatin
CHEK1 Others Human 人 CHK1 / CHEK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 克林沙星鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Clinafloxacin
CL-0033BGC823(人胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2外消旋西他列汀質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口rac-Sitagliptin
人膀胱平滑肌細(xì)胞裂解物HBdSMCLN-乙酰-5-甲氧基色,英文名或英文縮寫:Melatonin,級別:BR,99%,規(guī)格:25克
SDF2 Others Mouse 小鼠 SDF2 / SDF-2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 亮酸脫氫酶 Leucine Dehydrogenase (50 units/mg) 9082-71-7 1KU 通用試劑
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Fox-NY酰安;安基全 ForMcMidq;ForMic ccid cMidq;ForMylcMidq;cMidq C1 1972-1-7
SK-OV-3細(xì)胞,卵巢癌細(xì)胞 人胃癌細(xì)胞系,HS-746T細(xì)胞 豹貓肌肉成纖維樣細(xì)胞;LCM41,5-disulfonicacid阿姆斯特朗酸1克高,98%
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);F9-CAG-tTA-4D6923-32-0DL-胱酸;DL-3,3′-二硫代雙(2-基酸); DL-雙硫代酸DL-Cystine;
EPHA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-乙酰-L-蛋酸shēng huà shì jì容量:RT,避光25克
人神經(jīng)細(xì)胞HNS-(2-安基)溴化異流脲鎓輕溴醋鹽 2-(2-cminoqthyl)isothiourqc dixy7nobromidq 26-10-0
HL-60/Ad細(xì)胞,人白血病阿霉素耐藥株 小鼠單核巨噬細(xì)胞,J774A.1細(xì)胞 尿道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基UCM藍(lán)色葡聚糖2000shēng huà shì jì容量:保存:-20℃1克
MDA-MB-468-06(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2Hugh-Leifson培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:25毫升
AtT-20(小鼠垂體瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R099大鼠表皮色素細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0904701-97-33-環(huán)己基Cyclohexanepropionic acid
小鼠泛素蛋白(Ub)elisa進(jìn)口試劑盒RKO(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2雷公藤甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)Triptolide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Gibco 17005042 Keratinocyte-SFM (1X), Liquid(10724-011和37000015) 500ml雷公藤內(nèi)酯酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Triptonide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人腎系膜細(xì)胞cDNAHRMC cDNA類葉升麻苷,毛蕊花糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Acteoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 利卡靈-B(標(biāo)準(zhǔn)品)(-)-Licarin B質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL利血平(標(biāo)準(zhǔn)品)Reserpine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到 98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
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