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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>elisa進(jìn)口試劑盒>>小鼠elisa進(jìn)口試劑盒>> 小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)elisa進(jìn)口試劑盒
小鼠視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)elisa進(jìn)口試劑盒
小鼠生長(zhǎng)因子(GH)elisa進(jìn)口試劑盒
備試劑與收集血樣:
1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè), 2-8 ℃ 保存48 小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對(duì)照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
產(chǎn)品名稱 | 小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)elisa進(jìn)口試劑盒 |
英文名稱 | Mouse Annexin V (ANX- V) ELISA Kit |
貨號(hào) | BJ-G9916 |
規(guī)格:96T/48T
特點(diǎn):靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷
運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運(yùn)輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等
檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA進(jìn)口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無(wú)水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來(lái)水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說(shuō)明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到 98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來(lái)水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見(jiàn)附 1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過(guò)夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復(fù)染:自來(lái)水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
CSC, 小鼠心肌細(xì)胞 人小腸頸部表皮樣癌細(xì)胞,Ca Ski細(xì)胞 F81(貓腎細(xì)胞)甘丙肽(1-13)-神經(jīng)肽Y(25-36)酰胺(M32)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRGalanin (1-13)-Neuropeptide Y(25-36), amide (M32)
人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;UACC812甘丙肽信號(hào)關(guān)聯(lián)肽(1-41)酰胺;Preprogalanin(65-105)酰胺質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRGalanin Message Associated Peptide (1-41), amide; Preprogalanin(65-105), amide
ICAM1 Others Mouse 小鼠 ICAM-1 / CD54 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 胃泌素Ⅰ(1-14),人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRGastrin I (1-14) (human)
小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓MMSC-bm胃泌素釋放肽,人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRGastrin Releasing Peptide,human
CSF1 Others Human 人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 甘氨脫氧膽酸鈉(進(jìn)分)質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分,Sigma G9910 glycodeoxycholate
Promocell C-28040 Pericyte Growth Medium, 周細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基 500ml植物瓊脂shēng huà shì jì容量:RT支
人成纖維細(xì)胞;HFF5-羌基-DL-色安醋(+4°C) 5-xy7noxytryptophcn 26-69-9
TGFBR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 TGFBR2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 銀粉shēng huà shì jì容量:500克
F344大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells馬脾鐵蛋白shēng huà shì jì容量:25克
NW38細(xì)胞,人色素瘤細(xì)胞 鼠李糖乳桿菌 人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞;U251PVP-360 100g/250g/500g/5kg原裝 Sigma PVP360
MCF-7(NEW)細(xì)胞,人癌細(xì)胞 小鼠雜交瘤細(xì)胞,ST2/o細(xì)胞 HET-1A, 人食管上皮細(xì)胞考馬斯亮蘭R250,英文名或英文縮寫:Coomassie brilliant blue R250,級(jí)別:超,99%,規(guī)格:100克
MDA-MB-435(人癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2頭孢磺啶內(nèi) Cqfsulodinq wo7ium 212-93-9
HFDPC Pellet 人卵泡毛細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FMMARKS-ITDNAMOLECULARWEIGHTMARKERDNA Marker生物技術(shù)級(jí)FROZENsigma
CL-0414PC-3M-IE8(人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株)5×106cells/瓶×2硅膠60H25毫克2~8℃
FGF9 Others Canine 狗 FGF9 / FGF-9 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 125-20-2百里香酚酞;麝香草酚酞;麝香草酚麩;百里酚酞ThyMolphthalein ;DithyMolphthalide; 5′,5″-Diisopropyl-2′,2″-dimetxylpxenolphth- alein; 3,3-Bis(4-xy7noxy-2-metx-yl-5-isopropylpxenyl)phthalide;
小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)elisa進(jìn)口試劑盒人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;MuM-2B膠原酶I型(sigma)Collagenase, Type1質(zhì)量規(guī)格:≥125 CDU/mg ,Sigma分裝
CD164 Others Rat 大鼠 CD164 / Endolyn 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 膠原酶II型(sigma)Collagenase, Type2質(zhì)量規(guī)格:≥125 CDU/mg ,Sigma分裝
胎兒骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Fetal bone marrow mesenchymal stem cells膠原酶IV型(sigma)Collagenase, TypeIV質(zhì)量規(guī)格:≥160 CDU/mg,Sigma分裝
SHG-44細(xì)胞,神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 霉 人內(nèi)皮細(xì)胞RNAHLEC miRNA5 μg鉬酸鈉二水(AR) molybdate質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR
SC-1(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2硅酸鎂(高)Magnesium silicate質(zhì)量規(guī)格:>98%
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