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白介素elisa試劑盒時需要注意這幾點

時間:2018/4/18閱讀:173
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白介素elisa試劑盒時需要注意這幾點
1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
① 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
② 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
③ 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
④ 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
白介素elisa試劑盒大鼠血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒    ,英文名:    VEGF-D ELISA Kit    
大鼠血管內皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒    ,英文名:    VEGF-C ELISA Kit    
大鼠血管內皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒    ,英文名:    VEGF-B ELISA Kit    
大鼠血管內皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒    ,英文名:    VEGF ELISA Kit    
大鼠血管緊張素轉化酶2(ACE2)ELISA試劑盒    ,英文名:    ACE2 ELISA Kit    
大鼠血管緊張素轉化酶(ACE)ELISA試劑盒    ,英文名:    ACE ELISA Kit    
大鼠血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒    ,英文名:    aGT ELISA Kit    
大鼠血管緊張素Ⅱ轉化酶(ACEⅡ)ELISA試劑盒    ,英文名:    ACEⅡ ELISA Kit    
大鼠血管緊張素Ⅱ受體1(AT1R)ELISA試劑盒    ,英文名:    AT1R ELISA Kit    
大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒    ,英文名:    ANG-Ⅱ ELISA Kit    
大鼠血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA試劑盒    ,英文名:    ANGⅡ ELISA Kit    
大鼠血管緊張素Ⅰ轉化酶(ACEⅠ)ELISA試劑盒    ,英文名:    ACEⅠ ELISA Kit    
大鼠血管緊張素Ⅰ轉化酶(ACE)ELISA試劑盒    ,英文名:    ACE ELISA Kit    
大鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒    ,英文名:    Ang-Ⅰ ELISA Kit    
大鼠血管緊張素1-7(Ang1-7)ELISA試劑盒    ,英文名:    Ang1-7 ELISA Kit    
大鼠血管緊張素1-7(ANG 1-7)ELISA試劑盒    ,英文名:    ANG 1-7 ELISA Kit    
大鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒    ,英文名:    VIP ELISA Kit    
大鼠血管動蛋白(AMOT)ELISA試劑盒    ,英文名:    AMOT ELISA Kit    
大鼠溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA試劑盒    ,英文名:    BrdU ELISA Kit    
大鼠雄烯二酮(ASD)ELISA試劑盒    ,英文名:    ASD ELISA Kit    
大鼠雄激素(androgen)ELISA試劑盒    ,英文名:    androgen ELISA Kit    
大鼠胸腺素β-4(TMSB4X)ELISA試劑盒    ,英文名:    TMSB4X ELISA Kit    
大鼠胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)ELISA試劑盒    ,英文名:    TSLP ELISA Kit    
大鼠胸腺活化調節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒    ,英文名:    TARC/CCL17 ELISA Kit    
大鼠胸腺表達趨化因子25(TECK/CCL25)ELISA試劑盒    ,英文名:    TECK/CCL25 ELISA Kit    
大鼠性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒    ,英文名:    SHBG ELISA Kit    
大鼠信號轉導分子7(Smad7)ELISA試劑盒    ,英文名:    Smad7 ELISA Kit    
大鼠信號轉導分子1(Smad1)ELISA試劑盒    ,英文名:    Smad1 ELISA Kit    
大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒    ,英文名:    NN-T4 ELISA Kit    
大鼠鋅金屬硫蛋白(Zn-MT)ELISA試劑盒    ,英文名:    Zn-MT ELISA Kit 白介素elisa試劑盒   

 

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