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PCR反應(yīng)設(shè)計(jì)引物需考慮問(wèn)題2025/2/5
PCR反應(yīng)設(shè)計(jì)引物需考慮問(wèn)題：1．酶切位點(diǎn)兩個(gè)酶切位點(diǎn)應(yīng)是載體上的，所連接片斷上沒(méi)有這兩個(gè)位點(diǎn)，且距離不能太近，否則往往導(dǎo)致兩個(gè)酶都切不好。因此，兩個(gè)酶切位點(diǎn)要緊挨在一起，只能切一個(gè)，除非恰好是與上面...
防細(xì)胞污染的操作小技巧匯集2025/1/20
細(xì)菌污染尤為常見(jiàn)，一旦操作稍有不當(dāng)，就會(huì)引起細(xì)胞污染，細(xì)菌污染后顯微鏡下觀察呈現(xiàn)有黑色細(xì)條沙狀，當(dāng)然，根據(jù)感染的細(xì)菌不同，所呈現(xiàn)的狀態(tài)也不盡相同。防止污染這件事，真的沒(méi)有那么簡(jiǎn)單，給大家簡(jiǎn)單講述一下防...
ELISA競(jìng)爭(zhēng)法計(jì)算方法2025/1/13
在競(jìng)爭(zhēng)法ELISA中，陰性孔呈色深于陽(yáng)性孔。陰性呈色的強(qiáng)度取決于反應(yīng)中酶結(jié)合物的濃度和加入競(jìng)爭(zhēng)抑制物的量，一般調(diào)節(jié)陰性對(duì)照的吸光度在1.0-1.5之間，此時(shí)反應(yīng)為敏感。競(jìng)爭(zhēng)法ELISA不易用自視判斷結(jié)...
ELISA試驗(yàn)包被的方式2025/1/6
將抗原或抗體固定在過(guò)程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程。蛋白質(zhì)與(C8H8)n固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面...
多克隆抗體的制備2024/12/24
多克隆抗體的制備：1、免疫方法：對(duì)多克隆抗體，免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮內(nèi)免疫法、淋巴結(jié)免疫法和混合法等。一般來(lái)說(shuō)，皮下或肌肉免疫法產(chǎn)生的抗體比較多；皮內(nèi)免疫法所需的抗原量少，在抗原寶貴時(shí)特別...
細(xì)胞工程技術(shù)主要內(nèi)容包括什么？2024/12/17
1、動(dòng)植物細(xì)胞與組織培養(yǎng)該技術(shù)顯著的價(jià)值在于優(yōu)良植物的快速繁育與代謝產(chǎn)物的大量制備方面。動(dòng)植物細(xì)胞與組織培養(yǎng)可分為三個(gè)層次上的培養(yǎng)：細(xì)胞培養(yǎng)、組織培養(yǎng)和器官培養(yǎng)。2、細(xì)胞融合采用自然或人工的方法使兩個(gè)...
PCR反應(yīng)條件溫度與時(shí)間選擇技巧2024/12/9
PCR反應(yīng)條件的選擇技巧主要體現(xiàn)在溫度、時(shí)間和循環(huán)次數(shù)上，溫度過(guò)高，延伸時(shí)間不夠都會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有很大的影響。PCR反應(yīng)條件三要素為溫度、時(shí)間和循環(huán)次數(shù)。溫度與時(shí)間的設(shè)置基于PCR原理三步驟而設(shè)置變性-...
細(xì)胞老化的征兆2024/12/2
細(xì)胞老化的征兆1、細(xì)胞周期阻滯：長(zhǎng)期的細(xì)胞周期阻滯是老化細(xì)胞的基本特征，也是體外鑒定細(xì)胞老化的指標(biāo)。為了檢查細(xì)胞是否躍出了細(xì)胞周期，人們通常檢測(cè)增殖指示分子Ki-67的表達(dá)豐度；或者通過(guò)將與胸腺嘧啶相...
科研實(shí)驗(yàn)對(duì)抗體需求指導(dǎo)2024/11/26
科研實(shí)驗(yàn)工作離不開(kāi)抗體，WB、IP、IHC、IF、ChIP和FC都需要用到抗體，那么這幾種實(shí)驗(yàn)技術(shù)都需要什么樣的抗體呢？1.WBWB的蛋白經(jīng)過(guò)加熱變性之后都變成線性的結(jié)構(gòu)。因此*好的抗體是采用非常特異...
ELISA試驗(yàn)洗滌參數(shù)與次數(shù)介紹2024/11/18
ELISA即酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定，是一類常用的免疫酶技術(shù)。主要方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，然后利用酶標(biāo)記（偶聯(lián)）的抗體或抗原與之孵育，加入顯色劑顯色，通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定待測(cè)物顏色與標(biāo)準(zhǔn)物顏色的...
干血斑DNA快速提取試劑盒實(shí)驗(yàn)反應(yīng)條件優(yōu)化2024/11/4
干血斑DNA快速提取試劑盒實(shí)驗(yàn)反應(yīng)條件優(yōu)化：1、變性溫度和時(shí)間：保證模板DNA解鏈?zhǔn)潜ＷC整個(gè)PCR擴(kuò)增成功的關(guān)鍵。加熱90~95°C,30~60s，再?gòu)?fù)雜的DNA分子也可變性為單鏈。溫度過(guò)高或高溫持續(xù)...
ELISA試劑盒樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備2024/10/28
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。（1）血清室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。...
細(xì)胞冷凍保存方法?步驟與注意事項(xiàng)2024/10/21
冷凍保存方法：1、傳統(tǒng)方法:冷存管置于4℃10分鐘----20℃30分鐘----80℃16～18小時(shí)(或隔夜)---液氮槽vaporphase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止胞內(nèi)冰晶過(guò)大，造成...
ELISA酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)類型特點(diǎn)2024/10/14
ELISA實(shí)驗(yàn)就是酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（Enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）是將抗原或抗體結(jié)合在固相載體表面，利用抗原抗體的特異性結(jié)合以及抗體或者抗原上標(biāo)記的酶催化特...
細(xì)胞的凍存和復(fù)蘇過(guò)程2024/10/9
細(xì)胞的凍存和復(fù)蘇原理：在不加條件下直接凍存細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會(huì)形成冰晶，能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等，能引起細(xì)胞死亡。如向培養(yǎng)液加入保護(hù)劑，...
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