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IL-11elisa試劑盒試驗(yàn)時(shí)須注意以下的一些細(xì)節(jié):
1、實(shí)驗(yàn)板孔加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)孔的孵育時(shí)間一致。
2、固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維 素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。
3、包被抗體或抗原的選擇:將抗體或抗原吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一 般要求PH在9.0~9.6之間。
4、酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定。然后再固定其 它條件或采取“方陣法",在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
5、取出板條前恢復(fù)到室溫后再打開(kāi)外包裝袋,實(shí)驗(yàn)中不用的板條立即放回包裝中,密閉封口,其余不用試劑應(yīng)蓋好。
6、實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
7、洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水。
8、試劑盒內(nèi)試劑請(qǐng)?jiān)诒Y|(zhì)期內(nèi)使用,不同批號(hào)試劑不要混用。
9、酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而 本身無(wú)色。有些供氫體有潛在的致癌作用,ELIAS試劑盒應(yīng)注意防護(hù)。
10、1000pg/ml以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到的結(jié)果。大于1000pg/ml 的樣品應(yīng)以標(biāo)準(zhǔn)稀釋緩沖液稀釋后重做。在結(jié)果分析時(shí),結(jié)合考慮相應(yīng)的稀釋度。
11、按豬ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于 洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用 試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。
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