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大鼠elisa試劑盒操作方法:
1.包被抗體:用包被緩沖液稀釋特異性抗體球蛋白至*適濃度(1~10μg/ml),每凹孔加0.3ml,4℃過夜,或37℃水浴3小時,貯存冰箱。
2.洗滌:移去包被液,凹孔用洗滌緩沖液(含0.05%吐溫-20)洗3次,每次5分鐘。
3.分2組,a組加酶標(biāo)記抗原和被檢抗原混合液0.2ml,b組只加酶標(biāo)記抗原液0.2ml,37℃作用1~2小時。(混合液可作成不同稀釋度)
4.洗滌:移去包被液,凹孔用洗滌緩沖液(含0.05%吐溫-20)洗3次,每次5分鐘。
5.加入0.2 ml底物溶液于每個凹孔(OPD或OT),室溫作用30分鐘(另作一空白對照,0.4ml底物加0.1ml終止劑)。
6.加終止劑:每凹孔加2M H2SO4或2M檸檬酸0.05ml。
7.用酶標(biāo)比色計測定a、b兩組OD值,并求出a、b、OD值的差數(shù)。
大鼠elisa試劑盒注意事項:
1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實驗廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性,應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。
3.酶標(biāo)板從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,未用完的酶標(biāo)板需放入有干燥劑的密封袋中保存。
4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶,使用時需恢復(fù)至室溫以*溶解。
5.洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。
7.試驗結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8.不同批號試劑組分不得混用。
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