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其它細(xì)胞保存法

時(shí)間:2021/1/27閱讀:202
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1、其它細(xì)胞保存法

有些微生物當(dāng)遇到冷凍或單調(diào)等處理時(shí),因此在這種情況下,只能求助于傳代培養(yǎng)保存法。傳代培養(yǎng)便是要守時(shí)地進(jìn)行ATCC細(xì)胞轉(zhuǎn)接、培養(yǎng)后再保存,它是基本的微生物保存法,例如酸奶等常用菌種的保存。傳代保存時(shí),培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高,營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐盛,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在或許的范圍內(nèi)盡量下降。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸ATCC細(xì)胞,則應(yīng)在培養(yǎng)基中增加少數(shù)碳酸鈣。一般地,大多數(shù)菌種的保藏溫度以5℃為好,像厭氧菌、霍亂弧菌及部分病原真菌等微生物菌種則可以運(yùn)用37℃進(jìn)行保存,而蕈類等大型食用菌的ATCC細(xì)胞則可以室溫直接保存。

其它細(xì)胞保存法盡管簡(jiǎn)練,但其缺陷也很明顯,如:

①ATCC細(xì)胞管棉塞常常簡(jiǎn)略發(fā)霉;

②菌株的遺傳性狀簡(jiǎn)略產(chǎn)生變異;

③重復(fù)傳代時(shí),菌株的病原性、構(gòu)成生理活性物質(zhì)的才干以及構(gòu)成孢子的才干等均有下降;

④需求守時(shí)轉(zhuǎn)種,作業(yè)量大;

⑤雜菌的污染機(jī)會(huì)較多。

2、液體白臘覆蓋保存法

該法較前一種方法保存ATCC細(xì)胞的時(shí)間更長(zhǎng),適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。此法可防止單調(diào),并經(jīng)過(guò)限制氧的供給而到達(dá)削弱微生物代謝作用的目的。其具有方法簡(jiǎn)練的優(yōu)點(diǎn),一起也適用于不宜冷凍單調(diào)的微生物(如產(chǎn)孢才干低的絲狀菌)的保存,而某些細(xì)菌如固氮菌、乳酸桿菌、明串珠菌、分枝桿菌、紅螺菌及沙門(mén)氏菌等和一些真菌如卷霉菌、小克銀漢霉、毛霉、根霉等不宜選用此法進(jìn)行ATCC細(xì)胞保藏。

3、懸液保存法

即便微生物混懸于恰當(dāng)溶液中進(jìn)行保存的方法。常用的有:

① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)留心防止水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外,也可運(yùn)用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

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