抗體純化后，一般將其緩沖液置換成PBS，便于后期標(biāo)記或其他用途使用，如果濃度太低，需要濃縮,抗體濃縮后濃度最好不要太高，太高容易引起沉淀。

透析濃縮方法：

1.透析袋濃縮

將純化的抗體裝入透析袋中，透析袋表面覆滿PEG20,000進(jìn)行濃縮（不要用蔗糖濃縮）。

2.超濾管濃縮

將純化的抗體轉(zhuǎn)入15 ml的超濾管，3,500rpm離心12min左右（根據(jù)要濃縮的體積摸索離心時(shí)間）。

3.抗體濃度測定

取適量抗體檢測OD280nm的吸光度，讀數(shù)不要超過2。如果讀數(shù)超過2，再稀釋，用吸光度讀數(shù)除以1.35，再乘以稀釋倍數(shù)即為抗體的大致濃度（mg/ml）?？贵w的濃度（mg/ml）也可以用（OD280nm-0.35×OD495nm）/1.4這個(gè)公式計(jì)算。

抗體的保存：

抗體的保存需要注意以下幾個(gè)方面：

1.純化完的抗體推薦于PBS或者TBS溶液保存，可添加0.1%疊氮化 Na防腐劑，但是疊氮化Na可能對(duì)下游實(shí)驗(yàn)中的辣根過氧化物酶產(chǎn)生抑制作用，作為免疫檢測試劑開發(fā)的抗體一般使用有機(jī)化合物高分子防腐劑，避免對(duì)下游酶或者熒光染料的影響，如有需要可聯(lián)系福因德生物。

2.分裝成小管，避免污染或者反復(fù)凍融，溶解時(shí)需要緩慢解凍，不可直接放熱水急速解凍。

3.存放抗體容器不要選擇聚苯乙烯材料，可以選擇玻璃或者對(duì)蛋白低吸附材料的管子。

4.如果抗體要進(jìn)行后期標(biāo)記，最好在PBS中保存，不加防腐劑，短期內(nèi)使用可放4，長期存放-20保存。

5.如果抗體只做免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)，不進(jìn)行標(biāo)記可以添加保護(hù)劑（1% BSA或海藻糖），還可以加30%～50%甘油，-20保存，此保存方法只適合下游直接使用（ELISA，IHC，WB），不適合對(duì)其進(jìn)行標(biāo)記開發(fā)，但其在-20不結(jié)冰，對(duì)抗體效價(jià)保存較好，并且使用時(shí)也不用反復(fù)凍融。

6.凍干可以保存更長時(shí)間，但是同樣要加入很多輔料保護(hù)劑，如：海藻糖、BSA，加了保護(hù)劑后期開發(fā)較難；也可以直接不加輔料保護(hù)，直接凍干，但效價(jià)損失大。

7.不管用何種方法保存，應(yīng)盡量分裝成小管便于以后使用，抗體管上明確記錄必要信息（名稱、編號(hào)、時(shí)間，效價(jià)、純化人等）并且要建立記錄文檔記錄更詳細(xì)的信息。