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細胞凍存的步驟:
1、冷凍前一日前更換半量或全量培養(yǎng)基,觀察細胞生長情形。
2、使用ScienCell凍存液(貨號:0133)混合均勻,置于室溫下待用。
3、依細胞傳代培養(yǎng)的操作,收集培養(yǎng)好的細胞,取少量細胞懸浮液(約0.1 ml) 計數細胞濃度及凍前存活率。
4、離心,去除上清液,加入適量冷凍保存溶液,使細胞濃度為1-5 x 10^6 cells/ml,混合均勻,
分裝于已標示*之冷凍保存管中,1 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。
5、冷凍保存方法1: 冷凍管置于4 度10 分鐘→ -20 度 30 分鐘→ -80 度16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 長期儲存。
6、冷凍保存方法2: 冷凍管置于已設定程序之等速降溫機中,再放入液氮槽中。
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