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選對ELISA檢測試劑盒,事半功倍
1 查找待測樣本的蛋白濃度:可以通過美國國立生物技術(shù)信息中心(NCBI)的文獻(xiàn),Universal Protein(uniprot)上給出的蛋白表達(dá)量參考值來比較elisa試劑盒中給出的樣本值與報道值是否一致;
2 試劑盒的應(yīng)用種屬、檢測樣本的種類:除試劑盒特別說明外,一般不同種屬不能通用。常見待測樣本種類有:血清和血漿(不同抗凝劑),細(xì)胞上清,和細(xì)胞裂解液,試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用;
3 試劑盒的檢測范圍:也就是標(biāo)曲范圍,特別要注意待測樣本濃度是否落在標(biāo)曲范圍內(nèi),對于濃度很高的樣本,可以先進(jìn)行預(yù)實驗摸索到比較好的稀釋倍數(shù)后再大量測定樣本。
4 試劑盒中的稀釋線性及回收率:
a.稀釋線性一般指樣本稀釋線性,是將樣本梯度稀釋下來,看各稀釋梯度濃度是否成線性;參考樣本稀釋線性可以選擇樣本的稀釋倍數(shù);
b.稀釋線性也有做加標(biāo)稀釋線性的情況,加標(biāo)稀釋線性是將標(biāo)準(zhǔn)品加入樣本中測定加入的標(biāo)準(zhǔn)品濃度測定是否準(zhǔn)確;同樣也是確定待測樣本稀釋倍數(shù)的參考指標(biāo)。一般線性和回收率的范圍在80%-120%比較合適;
5 試劑盒的其它指標(biāo):
靈敏度:試劑盒能夠檢測到的樣本低濃度的能力,如果待檢指標(biāo)含量很低,需要選擇高靈敏度的ELISA試劑盒;
6 試劑盒的有效期:試劑盒的有效期一般是半年,樣本準(zhǔn)備時間需要考慮到試劑盒的有效期。
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