當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗原理>>其它ELISA試劑盒實(shí)驗原理>> 48T/96T中性粒細(xì)胞防御素1-3ELISA試劑盒免費(fèi)包郵
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
中性粒細(xì)胞防御素1-3ELISA試劑盒免費(fèi)包郵 | neutrophil peptide 1-3 | FS-P66153 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實(shí)驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
神經(jīng)特異性轉(zhuǎn)錄因子DPF1抗體NR1/NMDAR1 human 人N--D-天冬氨受體-1青蒿琥酯(標(biāo)準(zhǔn)品)
N-乙酰轉(zhuǎn)移酶8抗體Human PAF (plaetactivating factor) 人血小板活化因子青蒿琥酯
N-乙酰轉(zhuǎn)移酶8B抗體Human Endostatin 人內(nèi)皮抑素舒必利(標(biāo)準(zhǔn)品)
NOMO蛋白抗體BNP(Human) 人腦鈉素/腦鈉尿肽沙丁(標(biāo)準(zhǔn)品)
鈉離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體TNF- Alpha 人腫瘤壞死因子-α水楊鎂(標(biāo)準(zhǔn)品)
鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體TNF- Beta 人腫瘤壞死因子-β司坦唑
磷化鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體6His-Tag 6個組氨司坦唑(標(biāo)準(zhǔn)品)
神經(jīng)穿透素2抗體ACE Human 人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶妥英鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)
腦啡肽酶2抗體Activin A Human 人激活素 A辛可尼?。?biāo)準(zhǔn)品)
A型流感病核蛋白抗體ALCAM Human 人白活化粘附因子鹽安他唑啉(標(biāo)準(zhǔn)品)
神經(jīng)粘附分子2抗體Amphiregulin Human 人角化內(nèi)分泌因子烏利司他
巢蛋白1抗體Angiopoietin-2 Human 人血管生成素-2鹽酚芐明(標(biāo)準(zhǔn)品)
痛覺調(diào)節(jié)肽NPFF抗體APO E Human 人載脂蛋白 E那林(標(biāo)準(zhǔn)品)
神經(jīng)緊張素抗體AVP Human 人抗利尿激素貝諾酯(標(biāo)準(zhǔn)品)
鼻咽上皮特異性蛋白1抗體BMP-9 Human 人骨成型蛋白-9半乳糖(標(biāo)準(zhǔn)品)
中性粒細(xì)胞防御素1-3ELISA試劑盒免費(fèi)包郵Anti-RELA Antibody貝倫格葡萄座腔菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Anti-RELA Antibody無二檸檬桿菌拉丁屬名: Citrobacter amalonaticus
Anti-RELB Antibody腸膜明串珠菌右旋葡聚糖亞種拉丁屬名: Leuconostoc mesenteroides subsp.dextranicum
Anti-RELA Antibody檸檬綠木霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Anti-RELA Antibody黏液桿菌拉丁屬名: Mucilaginibacter polytrichastri
Anti-RELB Antibody木蹄層孔菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Anti-REN/Renin Antibody仰孔菌用途: 藥用
Anti-RETN Antibody波蘭青霉拉丁屬名: Penicillium polonicum
Anti-REPRIMO(RPRM) Antibody繩生毛殼拉丁屬名: Chaetomium funicola
Anti-RET Antibody吉氏庫特菌拉丁屬名: Kurthia gibsonii
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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