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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>抑制劑激活劑>> HDAC抑制劑(Mocetinostat)
貨號(hào) | FS-X10406 |
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英文名稱:Mocetinostat
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號(hào):FS-X10406
產(chǎn)品介紹:
英文名稱:Mocetinostat 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Mocetinostat是一種有效的亞型選擇性的HDAC抑制劑,作用于HDAC1,HDAC2,HDAC3和HDAC11,IC50分別為0.15,0.29,1.66和0.59μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):726169-73-9 別名:MGCD0103 純度:99.49% 分子量:396.44 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
枯草芽孢桿菌PELO蛋白抗體Anti-ANGPT2 Antibody超磷化微管相關(guān)蛋白tau(hyper phosphorylated MAPT)
相思根瘤菌P因子/備解抗體Anti-ANGPT2 Antibody腸脂肪結(jié)合蛋白(iFABP)
枯草芽孢桿菌PSF2蛋白抗體Anti-ANGPTL3 Antibody腸三葉因子(ITF)
大腸埃希菌腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常同源蛋白抗體Anti-ANGPTL1 Antibody腸病(Enterovirus)
產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型阿黑皮原抗體Anti-ANGPTL2 Antibody層粘連蛋白亞基γ-2(LAMC2)
韌革菌屬腸道病71型/手足口病病抗體Anti-ANGPTL3 Antibody層粘連蛋白β1(LN-β1)
Lysinibacillu xylanilyticus蛋白質(zhì)磷2B抗體 PP2A β PP2A-βAnti-ANGPTL8 Antibody層粘連蛋白-5(LN-5)
陰溝腸桿菌胞粘蛋白1抗體抗體Anti-ANGPTL4 Antibody層粘連蛋白(LN)
大腸埃希氏菌絲/蘇蛋白激18Anti-ANLN Antibody層連蛋白/板層(LN)
慢生根瘤菌表面受體PILRβ抗體Anti-Annexin IV Antibody布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種孤兒核受體PAR1抗體Anti-ANO1 Antibody布盧姆綜合征蛋白(BLM)
pGLuc-Basic多型性腺瘤基因1蛋白抗體Anti-ANO1 Antibody不透光相關(guān)蛋白(OPAs)
節(jié)桿菌屬早幼粒白血病鋅指蛋白抗體Anti-ANPEP Antibody不耐熱腸B亞單位(LTB)
白腐盾殼霉骨架蛋白C端PDLIM1抗體Anti-ANPEP Antibody不對(duì)稱二甲基精(ADMA)
香茅假單胞菌腫瘤抑制基因野生型P53單抗Anti-ANXA1 Antibody補(bǔ)體因子I(CFI)
少根根霉磷脂轉(zhuǎn)移蛋白抗體Anti-ANXA10 Antibody補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白1(CFHR1)
: D50資源名稱: 丁香直絲鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
中華被毛孢Hirsutella sinensis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
HDAC抑制劑(Mocetinostat)谷棒桿 6-羥基煙轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子
四川散斑殼 3-甲乙酯IV型膠原
遼寧盤孢 氫化可的槍乙因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1
大腸埃希氏 吡啶-3-甲8-異前列腺F2
昆明假諾卡氏 α-鄰苯乙酮核轉(zhuǎn)錄因子p65
球孢鏈霉球孢亞種 3-氟-5-硝苯胞尿鳥結(jié)合蛋白1
寒冷桿 3-甲單氨氧化A
馬賽博斯氏 降烯乳脫氫同工-X
托魯斯山鏈霉 N-(3-氨基基)二乙乙酰氧化
深紅酵母 二乙基酮肉堿脂酰轉(zhuǎn)移Iα
水單胞 環(huán)戊二烯基鈉甘油-3-磷?;D(zhuǎn)移
環(huán)狀芽胞桿 4--2-甲硫基嘧啶白介2可溶性受體α鏈
黑腐皮殼 2,4-二-5-硝基嘧啶I型前膠原氨基端肽
金霉鏈霉 1,6-脫水-β-D-葡萄糖蛋白質(zhì)羰基化合物
秦氏蜜環(huán) 1,2,3,4-四氫-1-萘鹽鹽蛋白質(zhì)亞硝基化
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