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當前位置：上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞生物學試劑>>抑制劑激活劑>> MCL1抑制劑(S63845)
| 貨號 | FS-X10407 |
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產品介紹:
英文名稱：S63845 產品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg S63845是高效選擇的骨髓細胞白血病1(MCL1)抑制劑；結合MCL1的Kd值為0.19nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：1799633-27-4 純度：99.77% 分子量：829.26 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱：MCL1抑制劑(S63845)
英文名稱：S63845
產品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10407
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
擬隱孢殼磷肌磷脂PLCZ1抗體Anti-ANXA1 Antibody(PB0094)補體因子H(CFH)
E.coli BL21(DE3)codon plus磷脂磷2b抗體Anti-ANXA1 Antibody補體因子D(CFD)
豇豆慢生根瘤菌磷化端粒結合蛋白P23抗體Anti-ANXA2 Antibody補體因子B前體(pre-CFB)
羅倫隱球酵母羅倫變種磷二酯5A抗體Anti-ANXA3 Antibody補體調節(jié)蛋白(CCP)
山茶節(jié)律抑制蛋白PER1抗體Anti-ANXA3 Antibody補體片斷5b(C5b)
溜曲霉節(jié)律蛋白2抗體Anti-ANXA3 Antibody補體片斷5a(C5a)
果生鏈核盤菌線粒體蛋白酪磷1抗體Anti-ANXA4 Antibody補體片斷4b(C4b)
孟氏假單胞菌蛋白體復合物C5抗體Anti-ANXA3 Antibody(PB0389)補體片斷3b(C3b)
產黃青霉重組豬乙腦病結構蛋白抗體Anti-ANXA4 Antibody補體片斷3a(C3a)
串珠鐮孢磷甲羥戊激抗體Anti-ANXA6 Antibody補體片段4d(C4d)
鏈霉菌Phocein蛋白抗體Anti-ANXA5 Antibody補體片段3d(C3d)
毛栓孔菌蛋白體PSMα4/20S Proteasome α4抗體Anti-ANXA5 Antibody(PB0010)補體片段3c(C3c)
濟州單胞菌朊病/感染性蛋白抗體Anti-ANXA6 Antibody補體片段3b受體(C3bR)
傘枝犁頭霉4-磷磷脂酰肌5激1樣蛋白抗體Anti-ANXA6 Antibody補體蛋白9(C9)
單孢共頭霉多重生變種磷化磷脂酰肌激PIK3-γ抗體Anti-ANXA7 Antibody補體蛋白5(C5)
孢吸水鏈霉菌B淋巴白血病前體蛋白轉錄因子1抗體Anti-ANXA8 Antibody補體蛋白4(C4)
黑木耳Auricularia│auricula-judae 質量規(guī)格：>99%,BR
破傷風梭菌Clostridium│tetani 質量規(guī)格：>99%,BR
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規(guī)格：>99%,BR,一
MCL1抑制劑(S63845)枯草芽孢桿 N,N'-二環(huán)己基-4-嗎啉脒一氧化氮代謝產物
大腸埃希氏 甲基酯硫類肝
蘑菇輪枝孢 對溴肉桂多藥耐藥基因
熱帶假絲酵母 三（2,4-二甲苯基）膦絲消旋
枯草芽孢桿 2-乙酰基-6-溴吡啶甲狀腺轉運體
Bacillus aryabhattai Shivaji et al. 6-溴-4-二氫色原酮消退D1
短小芽孢桿 5-溴喹啉脂氧A4
齒孢青霉 甘脲豆莢蛋白
豬瘟病RT-nPCR 3-(2-羥基苯基)白介37
大腸埃希氏 對叔丁基芐硫金屬蛋白
黑綠青霉 三氟磺汞半胱蛋白3
茶褐斑盤多毛孢 (-)-假木賊堿尿微量白蛋白
熒光假單胞同型小種G 吖啶橙磷烯式酮羧激
東方伊薩酵母 (R)-(+)-1-[(R)-2-(2'-Di-3,5-xylylphosphinophenyl)f調停蛋白復合體亞基1重組蛋白
暗黑橄欖色鏈霉 色酮-2-甲糖還原
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