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貨號 | FS-01S63628 |
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產(chǎn)品名稱:αGALα半乳糖苷酶可見分光光度法
規(guī)格:50管/24樣
檢測方法:可見分光光度法
貨號:FS-01S63628
商品介紹:
測定意義 α-GAL (EC 3.2.1.22)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,能專一地催化α半乳糖苷鍵的水解,主要參與棉子糖、水蘇糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL對于植物種子的萌發(fā)至關重要,種子萌發(fā)初期,其催化產(chǎn)生的D-半乳糖通過糖酵解途徑迅速轉化和消耗,為種子的萌發(fā)提供最初的能量來源,后期則主要參與細胞壁儲藏多糖水解。 測定原理: α-GAL分解對-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成對-硝基苯,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算α-GAL活性。 自備用品: 可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
1、細胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
猴蛋白聚糖(PG)試劑盒Human NUP53 ELISA KitMyc基因相關X因子抗體
猴膜橋蛋白試劑盒 Human NUDCD3 ELISA Kit凋亡信號調節(jié)激1抗體
猴骨橋(OPN)試劑盒Human GNRH1(Progonadoliberin-1) ELISA KitNFKB激活蛋白1抗體
猴III型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTX-III)試劑盒 Human NUDT10 ELISA Kit磷化Myc基因相關X因子抗體
猴集落激因子2受體α (CSF2Rα)試劑盒Human NUDT11(Diphosphoinositol polyphosphate phosphohydrolase 3-beta) ELISA Kit亞甲基四氫葉還原MTHFR抗體
猴鈣周期蛋白結合蛋白(CACYBP)試劑盒Human NUDT16 ELISA KitMEK1/MAPKK1抗體(N-端)
猴骨成型蛋白1(BMP-1)試劑盒 Human NUDT12 ELISA Kit褪黑受體1B抗體
猴滑行蛋白β(TXLNb)試劑盒Human NUDT19 ELISA Kit多藥耐藥相關蛋白4抗體
猴速激肽受體3(TACR3)試劑盒Human NUDT2 ELISA Kit多藥耐藥相關蛋白5抗體
猴亞甲基四氫葉還原(MTHFR)試劑盒Human NUDT2 ELISA Kit線粒體內膜蛋白抗體
猴球蛋白A Fc段受體(FcαR/CD89)試劑盒 Human NUDT16 ELISA Kit基質金屬蛋白-8/膠原2抗體
猴雙腎上腺皮質樣激1(DCLK1)試劑盒Human NUAK2 ELISA Kit基質金屬蛋白11抗體
猴β-黑色(βMSH)試劑盒 Human NUAK2 ELISA Kit基質金屬蛋白-12抗體
猴蛋白激C-γ(PKCγ)試劑盒Human NUDT19 ELISA Kit基質金屬蛋白-15抗體
猴表皮生長因子(EGF)試劑盒Human NUB1 ELISA Kit基質金屬蛋白-16抗體
αGALα半乳糖苷酶可見分光光度法乙基 AR,98.5% 色C 95%Anti-FGF4/HSTF1/HBGF-4/FITC 熒光標記纖維母生長因子4抗體IgG
乙基 >99.5%(GC)聚烯 熔融指數(shù) 0.5g/10minAnti-FGF5/FITC 熒光標記纖維母生長因子5抗體IgG
草 CP,99.5%聚烯 熔融指數(shù) 4g/10minAnti-KGF/FGF-7/FITC 熒光標記角質形成生長因子受體/纖維母生長因子-7抗體IgG
草 GR,99.8%聚烯 熔融指數(shù) 12g/10minAnti-FGF-8/HBGF-8/FITC 熒光標記成纖維生長因子-8/纖維母生長因子-8抗體IgG
2-氯煙 98%聚烯 熔融指數(shù) 35g/10minAnti-FGF-13/FITC 熒光標記抗纖維母生長因子-13抗體IgG
1,10-癸二 98%聚烯 熔融指數(shù) 2.2g/10minAnti-FGF-10/FITC 熒光標記成纖維生長因子-10/纖維母生長因子-10抗體IgG
十二烷二 99%聚烯 熔融指數(shù) 0.3g/10min (1.3 @5kg Anti-bFGF-R/FGFR1/FITC 熒光標記纖維母生長因子受體1抗體IgG
1,2-十六烷二 95%氯化金(III) 水合物 Au ≥48%Anti-PLCG 1/PLC gamma 1/FITC 熒光標記磷酯Cγ1抗體IgG
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