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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>其它系列>> MnP錳過(guò)氧化物酶檢測(cè)試劑盒微量法
貨號(hào) | FS-01S63826 |
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公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過(guò)產(chǎn)品,售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠(chéng)為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱:MnP錳過(guò)氧化物酶檢測(cè)試劑盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
檢測(cè)方法:微量法
貨號(hào):FS-01S63826
商品介紹:
測(cè)定意義 錳過(guò)氧化物酶(EC1.11.1.13)是一種含亞鐵血紅素的過(guò)氧化物酶,主要存在于擔(dān)子菌中,屬于木質(zhì)素降解酶系,能有效的降解木質(zhì)素及廢水和土壤中比較難降解的氯化物,疊氮化合物、DTT,多環(huán)芳烴等。 測(cè)定原理 錳過(guò)氧化物酶在Mn2+存在的條件下,將愈創(chuàng)木酚氧化為四鄰甲氧基連酚,在465nm有特征吸收峰。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、研缽、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、微量石英比色皿、恒溫水浴鍋。 |
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。 |
粗酶液提取:
1、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
HAND2 心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白2抗體 * 0.1ml
MYF5 生肌決定因子Myf5抗體 * 0.1ml
SCC112/PIG54 細(xì)胞增殖誘導(dǎo)蛋白54抗體 * 0.1ml
EBNA1/EBV Nuclear Antigen EB病核抗原1抗體 * 0.2ml
β-synuclein/SNCB 核突觸蛋白β抗體 * 0.2ml
KDEL (ER Marker) 賴,天冬,谷,亮相關(guān)序列抗體 * 0.2ml
RAG1/RNF74 環(huán)指蛋白74抗體(重組激活基因1) * 0.2ml
POMC 阿黑皮原抗體 * 0.1ml
FBXL11 FBXL11蛋白抗體 * 0.2ml
ASAP1/DDEF1 發(fā)育分化增強(qiáng)因子1抗體 * 0.1ml
phospho-ER-beta(ser87) 磷化雌受體β抗體 * 0.1ml
phospho-ASAP1/DDEF1(Tyr782) 磷化發(fā)育分化增強(qiáng)因子1抗體 * 0.1ml
RAG2 重組激活基因2蛋白抗體 * 0.2ml
ASMTY/HIOMT 松果體N甲基乙酰羥色胺抗體 * 0.2ml
GNAO1/G0 Protein alpha G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合蛋白O亞基A2抗體 * 0.2ml
MnP錳過(guò)氧化物酶檢測(cè)試劑盒微量法熒光PE標(biāo)記豬胰島蛋白Anti-IKBKB Antibody小鼠垂體腺苷環(huán)化激活肽27(PACAP-27)elisa定量檢測(cè)試劑盒
熒光PE標(biāo)記血藍(lán)蛋白Anti-IKZF2 Antibody小鼠白介1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)elisa定量檢測(cè)試劑盒
熒光PE標(biāo)記Anti-IKBKG Antibody小鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)elisa定量檢測(cè)試劑盒
熒光PE標(biāo)記胰糜蛋白Anti-IKZF3 Antibody小鼠組織型纖溶原激活劑(t-PA)elisa定量檢測(cè)試劑盒
熒光APC標(biāo)記小鼠IgG(流式同型對(duì)照)Anti-IL11RA Antibody小鼠轉(zhuǎn)錄因子20(TCF20)elisa定量檢測(cè)試劑盒
熒光APC標(biāo)記大鼠IgG(流式同型對(duì)照)Anti-IL12A Antibody小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)elisa定量檢測(cè)試劑盒
熒光APC標(biāo)記牛IgGAnti-IL13RA1 Antibody小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β4(TGF-β4)elisa定量檢測(cè)試劑盒
熒光APC標(biāo)記牛IgMAnti-IL15RA Antibody小鼠腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)elisa定量檢測(cè)試劑盒
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