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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>其它ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96T對(duì)氧磷酶ELISA試劑盒
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 對(duì)氧磷酶ELISA試劑盒 |
英文名稱 | paraoxonase |
貨號(hào) | FS-P65176 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
因子受體樣因子1抗體產(chǎn)品別名: 2-[(2,4-二)甲]-1H-苯并咪唑鹽阿米洛利
半胱氨亞磺脫羧酶抗體產(chǎn)品別名: 依法韋侖鹽艾司洛爾
型肝炎NS2反式調(diào)節(jié)蛋白/衰老相關(guān)的因10蛋白抗體產(chǎn)品別名: 4-溴-3,6-噠二酮鹽酮
固酮合成酶CYP11B2抗體產(chǎn)品別名: 1-Boc-4-哌啶鹽巴尼地平
分裂周期蛋白8抗體產(chǎn)品別名: 2-(1H-咪唑-1-)乙鹽鹽鹽貝那普利/苯那普利
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體產(chǎn)品別名: 7-氨-1,2,3,4-四氫喹啉鹽貝尼地平
分裂周期蛋白16抗體產(chǎn)品別名: 6,7-二氫-6-巰-5H-吡唑并[1,2-α][1,2,4]三氮唑化物鹽地爾卓
有絲分裂著絲粒蛋白F抗體產(chǎn)品別名: 爾它培南鈉鹽丁咯地爾
9號(hào)染色體開放閱讀框115抗體產(chǎn)品別名: 4-溴煙鹽多巴酚丁
CTDSPL蛋白抗體產(chǎn)品別名: 3-吡唑羧甲酯鹽氟桂利
CTDSPL2蛋白抗體產(chǎn)品別名: 2-溴甲-4-甲氧苯甲甲酯鹽決奈達(dá)隆
乙酰膽堿酯酶相關(guān)蛋白抗體產(chǎn)品別名: 二氫獼猴桃內(nèi)酯鹽喹那普利
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白83抗體產(chǎn)品別名: 3,4-二氟苯-1,2-二鹽拉貝洛爾
二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白5抗體產(chǎn)品別名: 4-異喹啉鹽洛美利
磷化二氫嘧啶酶樣2抗體產(chǎn)品別名: 2-甲-3-甲-4-(3-甲氧氧)吡啶鹽鹽鹽馬尼地平
對(duì)氧磷酶ELISA試劑盒Human MFN2(Mitofusin-2) ELISA Kit優(yōu)美氈被孔菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human NT-proP(N-Terminal Pro-C-Type Natriuretic Peptide) ELISA Kit米根霉拉丁屬名: Rhizopus oryzae
Human VDAC1(Voltage-dependent anion-selective channel protein 1) ELISA Kit大豆擬莖點(diǎn)霉拉丁屬名: Phomopsis longicolla
Human ASMA(Anti Smooth Muscle Antibody) ELISA Kit乳桿菌屬拉丁屬名: Lactobacillus sp.
Human ILDR2(Immunoglobulin-like domain-containing receptor 2) ELISA Kit強(qiáng)壯類芽胞桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human NPY(Neuropeptide Y) ELISA Kit楊爛皮殼蕉孢菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human HAS3(Hyaluronan Synthase 3) ELISA Kit腐蝕檸檬桿菌拉丁屬名: Citrobacter rodentium
Human PRODH(Proline dehydrogenase 1, mitochondrial) ELISA KitpRE112 拉丁屬名: 宿主:DH5α,BL21
Human DJ-1/PARK 7 ELISA Kit朗假絲酵母拉丁屬名: Candida haemulonii
Human NAC-alpha(Nascent polypeptide-associated complex subunit alpha) ELISA Kit愛媛鏈輪絲菌用途: 代謝產(chǎn)物具有弱的抗菌活性。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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